Pediatric Hematology/Oncology and ImmunopathologyPediatric Hematology/Oncology and ImmunopathologyВопросы гематологии/онкологии и иммунопатологии в педиатрии1726-17082414-9314Fund Doctors, Innovations, Science for Children101710.24287/1726-1708-2025-24-2-80-85LCDFRGORIGINAL ARTICLESОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИResearch ArticleCytofluorometry analysis of red blood cell suspension properties: results of a pilot studyЦитофлуориметрический анализ свойств эритроцитной взвеси: результаты пилотного исследованияhttps://orcid.org/0000-0003-0625-1743ChabinIvan A.ЧабинИван Андреевич
Russian Federation
ivan.chabin@dgoi.ruhttps://orcid.org/0000-0001-8013-1112PodoplelovaNadezhda A.ПодоплеловаНадежда Александровна
Russian Federation
no-reply@eco-vector.ruhttps://orcid.org/0000-0002-0193-0723ArtemenkoElena O.АртеменкоЕлена Олеговна
Russian Federation
lartemenko@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0002-1219-8654StarostinNikolay N.СтаростинНиколай Николаевич
Russian Federation
no-reply@eco-vector.ruhttps://orcid.org/0000-0002-0231-1617TrakhtmanPavel E.ТрахтманПавел Евгеньевич
Russian Federation
trakhtman@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0003-2756-7325SmetaninaNataliya S.СметанинаНаталия Сергеевна
Russian Federation

MD, Dr. Sci. (Medicine), Professor

д-р мед. наук, профессор

Nataliya.Smetanina@dgoi.ruhttps://orcid.org/0000-0002-8128-7757PanteleevMikhail A.ПантелеевМихаил Александрович
Russian Federation

Corresponding Member of the RAS, Dr. Sci. in Physics and Mathematics, Professor

член-корр. РАН, д-р физ.-мат. наук, профессор

mapanteleev@yandex.ruDmitry Rogachev National Medical Research Center of Pediatric Hematology, Oncology and ImmunologyФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр детской гематологии, онкологии и иммунологии им. Дмитрия Рогачева» Минздрава РоссииCenter for Theoretical Problems of Physical and Chemical Pharmacology, Russian Academy of SciencesФГБУН «Центр теоретических проблем физико-химической фармакологии» РАНRussian Medical Academy of Continuous Professional EducationФГБОУ «Российская медицинская академия непрерывного профессионального образования» Минздрава РоссииLomonosov Moscow State University, MoscowФГБОУ ВО «Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова»080920253006202524280850709202507092025Copyright ©; 2025, «D. Rogachev NMRCPHOI»Copyright ©; 2025, ФГБУ «НМИЦ ДГОИ им. Дмитрия Рогачева» Минздрава России2025«D. Rogachev NMRCPHOI»ФГБУ «НМИЦ ДГОИ им. Дмитрия Рогачева» Минздрава Россииhttps://creativecommons.org/licenses/by/4.0https://hemoncim.com/jour/article/view/1017

A wide use of blood products inevitably leads to an increase in the number of complications associated with it. These complications include thromboembolic events that are considered to be rare and difficult-to-manage. Currently, the mechanisms and possible laboratory predictors of such complications are unclear. This paper presents our experience of using flow cytometry to assess the parameters of phosphatidylserine expression (detected by Annexin V binding) and describes impairments in the deformability of red blood cells (detected using forward and side scatter data) which determine the procoagulant properties of cells. According to our findings, the use of Annexin V for the assessment of gradual cell death in the samples of red blood cell (RBC) suspension is controversial. At the same time, our results show a higher sensitivity of the assessment of the accumulation of RBCs with an altered shape for the detection of programmed cell death - eryptosis. The obtained results can be used to improve the detection of dead RBCs during the routine storage of RBC suspension. The study was approved by the Independent Ethics Committee and the Scientific Council of the Dmitry Rogachev National Medical Research Center of Pediatric Hematology, Oncology and Immunology of Ministry of Healthcare of the Russian Federation.

Широкое применение препаратов крови неизбежно ведет к увеличению числа осложнений, связанных с ним. Одним из редких и трудноконтролируемых осложнений являются тромбоэмболические события. В настоящее время механизмы и возможные лабораторные предикторы таких осложнений неясны. В данной работе представлен опыт применения проточной цитофлуориметрии для оценки параметров экспрессии фосфатидилсерина (детектируемой по связыванию аннексина V) и описаны нарушения деформируемости эритроцита (детектируемого по данным прямого и бокового светорассеяния), которые обусловливают прокоагулянтные свойства клеток. Полученные результаты демонстрируют спорную возможность применения аннексина V для оценки процесса постепенной гибели клеток в образцах эритроцитной взвеси, одновременно показывая большую чувствительность оценки накопления эритроцитов измененной формы для детекции программируемой клеточной гибели - эриптоза. Результаты данной работы могут быть использованы для улучшения детекции погибших эритроцитов в рутинной практике хранения эритроцитной взвеси. Настоящее исследование одобрено независимым этическим комитетом и утверждено решением ученого совета ФГБУ «НМИЦ ДГОИ им. Дмитрия Рогачева» Минздрава России.

red blood cell suspensionflow cytometryphosphatidylserinelactadherinannexin Vэритроцитная взвесьпроточная цитофлуориметрияфосфатидилсеринлактадхеринаннексин VРоссийский научный фондRussian Science Foundation25-25-20101McDavid K., Lien R., Chavez Ortiz J., BradLey T., Luciano A., Griffin I., et aL. Have we reached a new base-Line for bLood coLLection and transfusion in the United States? NationaL BLood CoLLection and UtiLization Survey, 2023. Transfusion 2025. DOI: 10.1111/trf.18187Free R.J., Sapiano M.R.P., Chavez Ortiz J.L., Stewart P., Berger J., Basavaraju S.V., et aL. Continued stabiLization of bLood coLLections and transfusions in the United States: Findings from the 2021 NationaL BLood CoLLection and UtiLization Survey. Transfusion 2023; 63 (SuppL 4): S8-18.Sokou R., Gounari E.A., Tsantes A.G., Piovani D., Bonovas S., Tsantes A.E., Iacovidou N. Bridging the evidence-to-practice gap: Advancing neonataL bLood transfusion. A narrative review of recent guideLines. BLood Rev 2025; 71: 101282.Garozzo G., Messina R., Manca P., AquiLina A. Transfusion in hemogLobinopathies and red bLood ceLL aLLoimmunization: data from SiciLy, Sardinia and MaLta. BLood Transfus 2024; 22 (2): 111-21.Akselrod B.A., Balashova E.N., Bautin A.E., Bakhovadinov B.B., Biryukova L.S., Bulanov A.Yu., et al. Clinical guidelines for red blood cell transfusion. Gematologiya i transfusiologiya 2018; 63 (4): 372-435. (In Russ.)Аксельрод Б.А., Балашова Е.Н., Баутин А.Е., Баховадинов Б.Б., Бирюкова Л.С., Буланов А.Ю. и др. Клиническое использование эритроцитсодержащих компонентов донорской крови. Гематология и трансфузиология 2018; 63 (4): 372-435.Koch C.G. et al. Duration of red-cell storage and complications after cardiac surgery. N Engl J Med. N Engl J Med, 2008. Vol. 358, № 12. P. 1229¬1239.Koch C.G. et al. Duration of red-cell storage and complications after cardiac surgery. N Engl J Med. N Engl J Med, 2008. Vol. 358, № 12. P. 1229-1239.Goel R., Josephson C.D., Patel E.U., Petersen M.R., Makhani S., Frank S.M., et al. Perioperative Transfusions and Venous Thromboembolism. Pediatrics 2020; 145 (4): e20192351.Aung H.H., Tung J.-P., Dean M.M., Flower R.L., Pecheniuk N.M. Procoagulant role of microparticles in routine storage of packed red blood cells: potential risk for prothrombotic post-transfusion complications. Pathology 2017; 49 (1): 62-9.Peltier S., Marin M., Dzieciatkowska M., Dussiot M., Kalani Roy M., Bruce J., et al. Proteostasis and metabolic dysfunction characterize a subset of storage-induced senescent erythrocytes targeted for posttransfusion clearance. J Clin Invest 2025; 135 (9): e183099.Kumukova I.B., Trakht- man P.E., Starostin N.N., Borsakova D.V., Ignatova A.A., Fedotov A.Yu., et al. Comparison of laboratory parameters of X-ray irradiated erythrocyte suspensions and suspensions, prepared from whole blood pre-treated with ultraviolet in the presence of riboflavin. Pediatric Hematology/Oncology and Immunopathology 2018; 17 (1): 64-74. (In Russ.)Кумукова И.Б., Трахтман П.Е., Старостин Н.Н., Борсакова Д.В., Игнатова А.А., Федотов А.Ю. и др. Сравнение лабораторных показателей патогенредуцированных и рентгеноблученных эритроцитных взвесей. Вопросы гематологии/онкологии и иммунопатологии в педиатрии 2018; 17 (1): 64-74. DOI: 10.24287/1726-1708-201817-1-64-74Lang E., Pozdeev V.I., Xu H.C., Shinde P.V., Behnke K., Hamdam J.M., et al. Storage of erythrocytes induces suicidal erythrocyte death. Cell Physiol Biochem 2016; 39 (2): 668-76.Lu C., Shi J., Yu H., Hou J., Zhou J. Procoagulant activity of long-term stored red blood cells due to phosphatidylserine exposure. Transfus Med 2011; 21 (3): 150-7.Kumukova I.B., Starostin N.N., Levin P.A., Trakhtman P.E., Solopova G.G. Pathogen-reduced red blood cell suspension in pediatric transfusion practice. Russian journal of hematology and transfusiology 2025; 70 (1): 51-61. (In Russ.)Кумукова И.Б., Старостин Н.Н., Левин П.А., Трахтман П.Е., Солопова Г. Г. Патоген-редуцированная эритроцитная взвесь в детской трансфузионной практике. Гематология и трансфузиология 2025; 70 (1): 51-61. DOI: 10.35754/0234¬5730-2025-70-1-51-61Koltsova E., Avilova A., Nikolaeva E., Kolchin N., Butov K. Engineered Fluorescent Variants of Lactadherin C2 Domain for Phosphatidylserine Detection in Flow Cytometry. Biomolecules 2025; 15: 673.Pulliam K.E., Joseph B., Makley A.T., Caldwell C.C.1, Lentsch A.B., Goodman M.D., Pritts T.A., et al. Washing packed red blood cells decreases red blood cell storage lesion formation. Surgery 2021; 169 (3): 666-70.Xia H., Khanal G., Strachan B.C., Voros E., Piety N.Z., Gifford S.C., Shevkoplyas S.S. Washing in hypotonic saline reduces the fraction of irreversibly-damaged cells in stored blood: a proof-of-concept study. Blood Transfus 2017; 15 (5): 463-71.