Pediatric Hematology/Oncology and ImmunopathologyPediatric Hematology/Oncology and ImmunopathologyВопросы гематологии/онкологии и иммунопатологии в педиатрии1726-17082414-9314Fund Doctors, Innovations, Science for Children101810.24287/1726-1708-2025-24-2-96-103OXXNJIORIGINAL ARTICLESОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИResearch ArticleMorphology of a pure hematogone population isolated from normal and hematogone-rich bone marrowМорфология чистой популяции гематогонов, изолированной из нормального и обогащенного гематогонами костного мозгаhttps://orcid.org/0000-0001-9475-3318ZakirovaAnna O.ЗакироваАнна Олеговна
Russian Federation
no-reply@eco-vector.ruKormilitsinaMaria V.КормилицинаМария В.
Russian Federation
no-reply@eco-vector.ruhttps://orcid.org/0000-0001-7131-8006FedyaninaOlga S.ФедянинаОльга Сергеевна
Russian Federation
no-reply@eco-vector.ruhttps://orcid.org/0000-0002-7117-0168KhvastunovaAnna N.ХвастуноваАнна Николаевна
Russian Federation
alina_shunina@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-6460-9427FilatovAlexander V.ФилатовАлександр Васильевич
Russian Federation
no-reply@eco-vector.ruhttps://orcid.org/0000-0001-5946-0026KuznetsovaSophia A.КузнецоваСофья Алексеевна
Russian Federation
kuznetsova.sonya@gmail.comDmitry Rogachev National Medical Research Center of Pediatric Hematology, Oncology and ImmunologyФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр детской гематологии, онкологии и иммунологии им. Дмитрия Рогачева» Минздрава РоссииCenter for Theoretical Problems of Physical and Chemical Pharmacology, Russian Academy of SciencesФГБУН «Центр теоретических проблем физико-химической фармакологии» РАНMoscow Institute of Physics and Technology (National Research University)ФГАОУ ВО «Московский физико-технический институт (национальный исследовательский университет)»National Research Center “Institute of Immunology” of the Federal Medical Biological Agency of the Russian FederationГосударственный научный центр «Институт иммунологии» Федерального медико-биологического агентства, Москва0809202530062025242961030809202508092025Copyright ©; 2025, «D. Rogachev NMRCPHOI»Copyright ©; 2025, ФГБУ «НМИЦ ДГОИ им. Дмитрия Рогачева» Минздрава России2025«D. Rogachev NMRCPHOI»ФГБУ «НМИЦ ДГОИ им. Дмитрия Рогачева» Минздрава Россииhttps://creativecommons.org/licenses/by/4.0https://hemoncim.com/jour/article/view/1018

B-ceLL precursors (hematogones) account for Less than 5% of normaL bone marrow (BM) nucLeated ceUs but in some cLinicaL conditions the number of hematogones can be transientLy increased. Their morphoLogy has been characterized in patients with increased numbers of hematogones. However, the scarcity of hematogones and inabiLity to obtain their pure popuLation make it difficuLt to thoroughLy investigate the morphoLogy of these ceLLs in normaL BM. A pure popuLation of hematogones was isoLated as a fraction of CD10+ BM mononucLear ceLLs from 14 patients with increased numbers of hematogones and 12 heaLthy donors using microarrays with immobiLized antibodies to duster of differentiation (CD) antigens. We described the main morphoLogicaL subtypes of hematogones of normaL BM and anaLyzed the proportion of these ceUs among CD19+, CD22+, CD20+, and CD10+CD34+ BM mononucLear ceUs. One to nine percent of hematogones are 13-17 mm in diameter and have basophiLic cytopLasm, Lacy or fineLy reticuLated, bLastic chromatin and prominent nucLeoLi. The remaining hematogones are immature Lymphoid ceLLs that vary considerabLy in size (7-15 mm in diameter) and have scanty cytopLasm, smudged chromatin and absent nucLeoLi. Three to twenty-five percent of these ceLLs are Larger than 10 mm. CD10+CD34+ ceLLs do not show predominancy bLastic morphoLogy, however some bLast-Like hematogones express CD20. Hematogones in normaL BM are heterogeneous in morphoLogy and size. We found no apparent correLation between the morphoLogy of hematogones and their stages of maturation. The study was approved by the Independent Ethics Committee and the Scientific CounciL of the Dmitry Rogachev NationaL MedicaL Research Center of Pediatric HematoLogy, OncoLogy and ImmunoLogy of Ministry of HeaLthcare of the Russian Federation. ALL donors and patients gave their informed consent to BM aspiration and participation in future biomedicaL studies.

В-клеточные предшественники (гематогоны) составляют менее 5% нормальных ядросодержащих клеток костного мозга (КМ), но при некоторых клинических состояниях их процентное содержание может увеличиваться. Морфология гематогонов была охарактеризована у пациентов с их повышенным количеством. Однако малочисленность гематогонов и невозможность получения их чистой популяции затрудняют детальный морфологический анализ этих клеток в нормальном КМ. У 14 пациентов с повышенным содержанием гематогонов и 12 здоровых доноров с помощью биочипов с иммобилизованными антителами к антигенам кластеров дифференцировки (CD) была выделена чистая популяция гематогонов как CD10+-фракция мононуклеарных клеток КМ. Были описаны основные морфологические подтипы гематогонов здорового КМ и проанализирована доля этих клеток среди CD19+-, CD22+-, CD20+- и CD10+CD34+-мононуклеаров КМ. От 1 до 9% гематогонов имеют диаметр 13-17 мкм, базофильную цитоплазму, кружевную или мелкосетчатую бластную структуру хроматина и ярко выраженные ядрышки. Остальные гематогоны представляют собой незрелые лимфоидные клетки с широким распределением по размерам (7-15 мкм в диаметре), скудной цитоплазмой, «смазанным» хроматином и отсутствием ядрышек. От 3 до 25% клеток в последней категории имеют размер более 10 мкм. Клетки CD10+CD34+ не имеют преимущественно бластной морфологии, в то время как некоторые бластоподобные гематогоны экспрессируют CD20. Гематогоны в нормальном КМ неоднородны по морфологии и размеру. Явной корреляции между морфологией гематогонов и их иммунологической стадией созревания обнаружено не было. Исследование одобрено независимым этическим комитетом и утверждено решением ученого совета ФГБУ «НМИЦ ДГОИ им. Дмитрия Рогачева» Минздрава России. Было получено согласие доноров и пациентов на забор КМ и будущие биомедицинские исследования.

hematogonenormal B-cell precursorsmicroarrayCD antigensmorphologyimmunocytochemistryгематогонынормальные В-клеточные предшественникиклеточный биочипCD-антигеныморфологияиммуноцитохимияРоссийский научный фондRussian Science Foundation23-45-10039Vogel P., Erf L.A., Rosenthal N. Hematological Observations on Bone Marrow Obtained by Sternal Puncture. Am J Clin Pathol 1937; 7: 498¬515.Muehleck S.D., McKenna R.W., Gale P.F., Brunning R.D. Terminal deoxynucleotidyl transferase (TdT)-positive cells in bone marrow in the absence of hematologic malignancy. Am J Clin Pathol 1983; 79: 277-84.Janossy G., Bollum F.J., Bradstock K.F., McMichael A., Rapson N., Greaves M.F. Terminal transferase-positive human bone marrow cells exhibit the antigenic phenotype of common acute lymphoblastic leukemia. J Immunol 1979; 123: 1525-9.Janossy G., Bollum F., Bradstock K., Ashley J. Cellular phenotypes of normal and leukemic hematopoietic cells determined by analysis with selected antibody combinations. Blood 1980; 56: 430-41.LeBien T.W., Wormann B., Villablanca J.G., Law C.L., Steinberg L.M., Shah V.O., Loken M.R. Multiparameter flow cytometric analysis of human fetal bone marrow B cells. Leukemia 1990; 4: 354-8.Schmitt C., Eaves C.J., Lansdorp P.M. Expression of CD34 on human B cell precursors. Clin Exp Immunol 1991; 85: 168-73.Hokland B.Y.P., Rosenthal P., Griffin J.D., Nadler L.M., Daley J., Hokland M., et al. Purification and characterization of fetal hematopoietic cells that express the common acute lymphoblastic leukemia antigen (CALLA). J Exp Med 1983; 157: 114-29.Brady K.A., Atwater S.K., Lowell C.A. Flow cytometric detection of CD10 (cALLA) on peripheral blood B lymphocytes of neonates. Br J Haematol 1999; 107: 712-5.Loken M.R., Shah V.O., Dattilio K.L., Civin C.I. Flow cytometric analysis of human bone marrow. II. Normal B lymphocyte development. Blood 1987; 70: 1316-24.Chantepie S.P., Cornet E., Salaun V., Reman O. Hematogones: an overview. Leuk Res 2013; 37: 1404-11.McKenna R.W. Immunophenotypic analysis of hematogones (B-lymphocyte precursors) in 662 consecutive bone marrow specimens by 4-color flow cytometry. Blood 2001; 98: 2498-507.Mckenna R.W., Asplund S.L., Kroft S.H. immunophenotypic analysis of hematogones (B-lymphocyte precursors) and neoplastic lymphoblasts by 4-color flow cytometry. Leuk Lymphoma 2004; 45: 277-85.Longacre T.A., Foucar K., Crago S., Chen I.M., Griffith B., Dressler L., et al. Hematogones: a multiparameter analysis of bone marrow precursor cells. Blood 1989; 2: 543-53.Schuurmans Stekhoven J.H., Langenhuysen C.A., Bakkeren J.A., Holland R., Holler I., De Vaan G.A., Schretlen E.D. Morphology and incidence of the “posttherapeutic lymphoid cell” in the bone marrow of children with acute lymphoblastic leukemia. Am J Pathol 1986; 124: 46-52.Rimsza L.M., Larson R.S., Winter S.S., Foucar K., Chong Y.Y., Garner K.W., Leith C.P. Benign hematogone-rich lymphoid proliferations can be distinguished from B-lineage acute lymphoblastic leukemia by integration of morphology, immunophenotype, adhesion molecule expression, and architectural features. Am J Clin Pathol 2000; 114: 66-75.Ryan D., Chapple C., Kossover S., Sandberg A.A., Cohen H.J. Phenotypic similarities and differences between CALLA-positive acute lymphoblastic leukemia cells and normal marrow CALLA-positive B cell precursors. Blood 1987; 70: 814-21.Al-Shieban S., Byrne E., Trivedi P., Morilla R., Matutes E., Naresh K.N. Immunohistochemical distinction of haematogones from B lymphoblastic leukaemia/lymphoma or B-cell acute lymphoblastic leukaemia (B-ALL) on bone marrow trephine biopsies: A study on 62 patients. Br J Haematol 2011; 154 (4): 466-70.Don M.D., Lim W., Lo A., Cox B., Huang Q., Kitahara S., et al. Improved recognition of hematogones from precursor B-lymphoblastic leukemia by a single tube flow cytometric analysis. Am J Clin Pathol 2020; 153: 790-8.Sevilla D.W., Colovai A.I., Emmons F.N., Bhagat G., Alobeid B. Hematogones: a review and update. Leuk Lymphoma 2010; 51: 10-9.Fenneteau O., Lainey E. Valeur diagnostique du myelogramme au cours des pathologies constitutionnelles de l’enfant. Ann Biol Clin (Paris) 2007; 65: 483-503.Braham Jmili N., Nsaibia S., Jacob M.C., Omri H., Laatiri M.A., Yacoub S., et al. Immunophenotypic analysis of bone marrow B lymphocyte precursors (hematogones) by flow cytometry. Clin Lab Sci 2009; 22: 208-15.Fukushima T., Sumazaki R., Koike K., Tsuchida M., Matsui A., Nakauchi H. Multicolor flow-cytometric, morphologic and clonogenic analysis of marrow CD10-positive cells in children with leukemia in remission of nonmalignant diseases. J Pediatr Hematol Oncol 1998; 20: 222-8.Ortolani C. Flow Cytometry of Hematological Malignancies. Wiley-Blackwell; 2021.Khvastunova A.N., Kuznetsova S.A., Al-Radi L.S., Vylegzhanina A.V., Zakirova A.O., Fedyanina O.S., et al. Anti-CD antibody microarray for human leukocyte morphology examination allows analyzing rare cell populations and suggesting preliminary diagnosis in leukemia. Sci Rep 2015; 5: 12573.van Lochem E.G., van der Velden V.H.J., Wind H.K., te Marvelde J.G., Westerdaal N.A.C., van Dongen J.J.M. Immunophenotypic differentiation patterns of normal hematopoiesis in human bone marrow: reference patterns for age-related changes and disease-induced shifts. Cytometry B Clin Cytom 2004; 60: 1-13.Rosenthal S., Canellos G.P., Whang- Peng J., Gralnick H.R. Blast crisis of chronic granulocytic leukemia. Morphologic variants and therapeutic implications. Am J Med 1977; 63: 542-7.Martensson I.L., Almqvist N., Grimsholm O., Bernardi A.I. The pre-B cell receptor checkpoint. FEBS Lett 2010; 584: 2572-9.Karasuyama H., Rolink A., Shinkal Y., Young F., Alt F.W., Melchers F. The expression of Vpre-B/15 surrogate light chain in early bone marrow precursor B cells of normal and B cell-deficient mutant mice. Cell 1994; 77: 133-43.