Pediatric Hematology/Oncology and ImmunopathologyPediatric Hematology/Oncology and ImmunopathologyВопросы гематологии/онкологии и иммунопатологии в педиатрии1726-17082414-9314Fund Doctors, Innovations, Science for Children113910.24287/j.1139IXWQVXORIGINAL ARTICLESОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИResearch ArticlePathogen-specific immune reconstitution after hematopoietic stem cell transplantation using an αβ T cell depletion platform in children with acute leukemiaВосстановление патоген-специфичного иммунного ответа после трансплантации гемопоэтических стволовых клеток на платформе деплеции αβ-T-лимфоцитов у детей с острыми лейкозамиhttps://orcid.org/0000-0002-1384-1752DunaykinaMaria A.ДунайкинаМария Алексеевна
Russian Federation

a hematologist at Hematopoietic Stem Cell Transplantation Department No.1

врач-гематолог отделения трансплантации гемопоэтических стволовых клеток №1

centrles.it@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0003-0520-5630ShelikhovaL. N.ШелиховаЛ. Н.
Russian Federation
centrles.it@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0001-8754-1376BlagovS. L.БлаговС. Л.
Russian Federation
centrles.it@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0003-1216-817XKlimentovaM. A.КлиментоваМ. А.
Russian Federation
centrles.it@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-7387-9197PerminovaM. E.ПерминоваМ. Е.
Russian Federation
centrles.it@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-1873-3486OsipovaE. Yu.ОсиповаЕ. Ю.
Russian Federation
centrles.it@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0001-7281-5354NikolaevR. V.НиколаевР. В.
Russian Federation
centrles.it@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-4075-3133EfimenkoM. V.ЕфименкоМ. В.
Russian Federation
centrles.it@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-1680-7269SolopovaG. G.СолоповаГ. Г.
Russian Federation
centrles.it@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0003-2689-0569BalashovD. N.БалашовД. Н.
Russian Federation
centrles.it@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-0016-6698MaschanA. A.МасчанА. А.
Russian Federation
centrles.it@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0003-1735-0093MaschanM. A.МасчанМ. А.
Russian Federation
centrles.it@mail.ruThe Dmitry Rogachev National Medical Research Center of Pediatric Hematology, Oncology and Immunology of Ministry of Healthcare of the Russian FederationФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр детской гематологии, онкологии и иммунологии им. Дмитрия Рогачева» Минздрава России3006202625237492005202621052026Copyright ©; 2026, «D. Rogachev NMRCPHOI»Copyright ©; 2026, ФГБУ «НМИЦ ДГОИ им. Дмитрия Рогачева» Минздрава России2026«D. Rogachev NMRCPHOI»ФГБУ «НМИЦ ДГОИ им. Дмитрия Рогачева» Минздрава Россииhttps://creativecommons.org/licenses/by/4.0https://hemoncim.com/jour/article/view/1139

Introduction. Allogeneic hematopoietic stem cell transplantation (allo-HSCT) using a TCRαβ/CD19 depletion platform is associated with a low incidence of graft-versus-host disease, however, delayed immune reconstitution increases the risk of opportunistic viral reactivation.

Aim: to analyze the kinetics of pathogen-specific immune reconstitution and its impact on clinical outcomes of allo-HSCT.

Materials and methods. We performed a retrospective analysis on a cohort of 265 children from the prospective database of the Dmitry Rogachev National Medical Research Center of Pediatric Hematology, Oncology and Immunology. All patients underwent their first allo-HSCT from a haploidentical donor with TCRαβ/CD19 depletion between September 2016 and March 2022. Pathogen-specific T-cell responses were assessed by IFN-γ ELISPOT assays (cutoff ≥10 SFC/3 × 10⁵ MNC) on days +30, +60, +90, +180, and at 1 year after allo-HSCT.

Results. For cytomegalovirus (CMV), the proportion of ELISPOT-positive patients increased from 38.5 to 70% during the first year after allo-HSCT. For adenovirus, the proportion of ELISPOT-positive patients was 7% on day +30, 16% on day +90, and 38–49% from day +180 to 1 year. For Epstein–Barr virus, the proportion of ELISPOT-positive patients reached 22% at 1 year after allo-HSCT. On day +30, SFC counts for CMV showed the strongest correlation with CD3⁺CD8⁺ T cells; by 1 year, this association was no longer evident (R² = 0.005; p = 0.058). CMV ELISPOT positivity on day +30 correlated with CMV reactivation (57% vs 42%; p = 0.012), reflecting the effect of antigenic stimulation on T cell expansion. On day +60, ELISPOT positivity predicted a more favorable course of viremia, including a shorter duration of viremia (4 weeks vs 6 weeks; p = 0.023) and a lower peak viral load (9587 copies/mL vs 23 525 copies/mL; p = 0.029). The cumulative risk of transplant-related mortality was 3% (95% confidence interval 2–6); the trend toward lower transplant-related mortality in patients with ELISPOT positivity on day +30 did not reach statistical significance (1% vs 4%; p = 0.798).

Conclusion. Therefore, reconstitution of pathogen-specific immunity after allo-HSCT is antigen-dependent. The presence of virus-specific T cells is associated with more effective control of viremia.

Введение. Аллогенная трансплантация гемопоэтических стволовых клеток (алло-ТГСК) на платформе TCRαβ/CD19-деплеции ассоциирована с низкой частотой реакции «трансплантат против хозяина», но в связи с отсроченной иммунореконституцией возрастает риск реактивации оппортунистических вирусных инфекций.

Цель исследования – проанализировать кинетику восстановления патоген-специфичного иммунного ответа и его влияние на клинические исходы алло-ТГСК.

Материалы и методы. Проведен ретроспективный анализ когорты из проспективной базы НМИЦ ДГОИ им. Дмитрия Рогачева – 265 детей, получивших первую алло-ТГСК от гаплоидентичного донора с TCRαβ/CD19-деплецией с сентября 2016 г. по март 2022 г. Специфический Т-клеточный ответ оценивали методом IFN-γ ELISPOT (порог ≥10 SFC/3 × 10⁵ MNC) на +30, +60, +90, +180-е сутки и через 1 год после трансплантации.

Результаты. Для цитомегаловируса (ЦМВ) доля ELISPOT-позитивных пациентов выросла с 38,5 до 70,0% в течение 1 года после алло-ТГСК. Для аденовируса она составила 7% на +30-е, 16% на +90-е и 38–49% со +180-го дня до 1 года. Для вируса Эпштейна–Барр – 22% к 1 году после алло-ТГСК. На +30-е сутки количество ЦМВ-SFC сильнее всего коррелировало с CD3⁺CD8⁺; к 1 году связь нивелировалась (R² = 0,005; p = 0,058). ELISPOT-позитивность к ЦМВ на +30-е сутки коррелировала с реактивацией ЦМВ (57% против 42%; p = 0,012), что отражает влияние антигенной стимуляции на экспансию Т-лимфоцитов. На +60-е сутки ELISPOT-позитивность предсказывала более благоприятное течение виремии – ее меньшую длительность (4 нед против 6 нед; p = 0,023) и более низкий пик вирусной нагрузки (9587 копий/мл против 23 525 копий/мл; p = 0,029). Кумулятивный риск трансплантат-ассоциированной смертности составил 3% (95% доверительный интервал 2–6); тенденция к меньшему показателю смертности, связанной с трансплантацией, при ELISPOT-позитивности на +30-е сутки статистической значимости не достигла (1% против 4%; p = 0,798).

Заключение. Таким образом, восстановление патоген-специфичного иммунитета после алло-ТГСК носит антигензависимый характер. Наличие вирус-специфичных Т-лимфоцитов ассоциировано с более эффективным контролем виремии.

pathogen-specific immune responseopportunistic viral infectionsallogeneic hematopoietic stem cell transplantationпатоген-специфичный иммунный ответоппортунистические вирусные инфекцииаллогенная трансплантация гемопоэтических стволовых клетокLocatelli F., Merli P., Pagliara D., Li Pira G., Falco M., Pende D. et al. Outcome of children with acute leukemia given HLA-haploidentical HSCT after αβ T-cell and B-cell depletion. Blood 2017;130:677–85. DOI: 10.1182/BLOOD-2017-04-779769Handgretinger R. New approaches to graft engineering for haploidentical bone marrow transplantation. Semin Oncol 2012;39:664–73. DOI: 10.1053/J.SEMINONCOL.2012.09.007Масчан М.А. Деплеция альфа/бета-Т-лимфоцитов – надежная платформа для развития трансплантации гемопоэтических стволовых клеток от гаплоидентичных доноров. Российский журнал детской гематологии и онкологии 2015;2(3):34–8. DOI: 10.17650/2311-1267-2015-2-3-3438 [Maschan M.A. Depletion of alpha/beta-T-cells is a robust platform for haploidentical hematopoietic stem cell transplantation results improvement. Russian Journal of Pediatric Hematology and Oncology 2015;2(3):34–8. (In Russ.)].Maschan M., Shelikhova L., Ilushina M., Kurnikova E., Boyakova E., Balashov D. et al. TCR-alpha/beta and CD19 depletion and treosulfan-based conditioning regimen in unrelated and haploidentical transplantation in children with acute myeloid leukemia. Bone Marrow Transplant 2016;51:668–74. DOI: 10.1038/BMT.2015.343Laberko A., Bogoyavlenskaya A., Shelikhova L., Shekhovtsova Z., Balashov D., Voronin K. et al. Risk factors for and the clinical impact of cytomegalovirus and Epstein–Barr virus infections in pediatric recipients of TCR-α/β- and CD19-depleted grafts. Biol Blood Marrow Transplant 2017;23:483–90. DOI: 10.1016/j.bbmt.2016.12.635Балашов Д.Н., Трахтман П.Е., Скоробогатова Е.В., Скворцова Ю.В., Шипицына И.П., Масчан А.А. Факторы риска цитомегаловирусной инфекции у пациентов после аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток. Онкогематология 2010;(4):20–6. [Balashov D.N., Trakhtman P.E., Skorobogatova E.V., Skvortsova Yu.V., Schipitsyna I.P., Maschan A.A. Risk factors of cytomegalovirus infection in patients after allogeneic hematopoietic stem cells transplantation. Oncohematology 2010;(4):20–6. (In Russ.)].Fuji S., Kapp M., Einsele H. Monitoring of pathogen-specific T-cell immune reconstitution after allogeneic hematopoietic stem cell transplantation. Front Immunol 2013;4:65034. DOI: 10.3389/FIMMU.2013.00276/BIBTEXДунайкина М.А., Шелихова Л.Н., Шеховцова Ж.Б., Глушкова С.Ю., Николаев Р.В., Благов С.Л. и др. Безопасность и эффективность инфузий донорских лимфоцитов памяти после трансплантации гемопоэтических стволовых клеток на платформе деплеции αβ-T-лимфоцитов у детей с острыми лейкозами. Вопросы гематологии/онкологии и иммунопатологии в педиатрии 2021;20(2):12–28. DOI: 10.24287/1726-1708-2021-20-2-1228 [Dunaykina M.A., Shelikhova L.N., Shekhovtsova Zh.B., Glushkova S.Yu., Nikolayev R.V., Blagov S.L. et al. The safety and effctiveness of donor memory T lymphocyte infusions after hematopoietic stem cell transplantation with αβ T cell depletion platform in children with acute leukemia. Pediatric Hematology/Oncology and Immunopathology 2021;20(2):12–28. (In Russ.)].Dunaikina M., Zhekhovtsova Z., Shelikhova L., Glushkova S., Nikolaev R., Blagov S. et al. Safety and efficacy of the low-dose memory (CD45RA-depleted) donor lymphocyte infusion in recipients of αβ T cell-depleted haploidentical grafts: results of a prospective randomized trial in high-risk childhood leukemia. Bone Marrow Transplant 2021;56:1614–24. DOI: 10.1038/S41409-021-01232-XБлагов С.Л., Шелихова Л.Н., Балашов Д.Н., Осипова Е.Ю., Ефименко М.В., Хрипкова Н.А. и др. Применение профилактических инфузий СD45RA-деплетированных донорских лимфоцитов у пациентов, перенесших аллогенную трансплантацию гемопоэтических стволовых клеток с TCRαβ- и CD19-деплецией по поводу заболеваний незлокачественной природы. Вопросы гематологии/онкологии и иммунопатологии в педиатрии 2019;18(3):9–21. DOI: 10.24287/1726-1708-2019-18-3-921. [Blagov S.L., Shelikhova L.N., Balashov D.N., Osipova E.Yu., Efimenko M.V., Khripkova N.A. et al. Low-dose infusions of CD45RA depleted donor lymphocytes after TCRαβ-depleted transplantation in patients with non-malignant disorders. Pediatric Hematology/Oncology and Immunopathology 2019;18(3):9–21. (In Russ.)].Dana Flanders W., Lally C., Dilley A., Diaz-Decaro J. Estimated cytomegalovirus seroprevalence in the general population of the United States and Canada. J Med Virol 2024;96:e29525. DOI: 10.1002/JMV.29525Zuhair M., Smit G.S.A., Wallis G., Jabbar F., Smith C., Devleesschauwer B. et al. Estimation of the worldwide seroprevalence of cytomegalovirus: A systematic review and meta-analysis. Rev Med Virol 2019;29. DOI: 10.1002/RMV.2034Calderin Sollet Z., Schäfer A., Ferrari-Lacraz S., Masouridi-Levrat S., Mamez A.C., Pradier A. et al. CMV serostatus and T-cell repertoire diversity 5 years after allogeneic hematopoietic stem cell transplantation. Leukemia 2023;37:948–51. DOI: 10.1038/S41375-023-01836-W;TECHMETALjungman P., Brand R., Hoek J., De La Camara R., Cordonnier C., Einsele H. et al. Donor cytomegalovirus status influences the outcome of allogeneic stem cell transplant: a study by the European Group for Blood and Marrow Transplantation. Clin Infect Dis 2014;59:473–81. DOI: 10.1093/CID/CIU364Tormo N., Solano C., Benet I., Nieto J., De La Cámara R., López J. et al. Reconstitution of CMV pp65 and IE-1-specific IFN-γ CD8+ and CD4+ T-cell responses affording protection from CMV DNAemia following allogeneic hematopoietic SCT. Bone Marrow Transplant 2011;46:1437–43. DOI: 10.1038/BMT.2010.330Stern L., McGuire H.M., Avdic S., Fazekas de St Groth B., Gottlieb D., Abendroth A. et al. Immunoprofiling reveals cell subsets associated with the trajectory of cytomegalovirus reactivation post stem cell transplantation. Nat Commun 2022;13:1–16. DOI: 10.1038/S41467-022-29943-9;TECHMETAZvyagin I.V., Mamedov I.Z., Tatarinova O.V., Komech E.A., Kurnikova E.E., Boyakova E.V. et al. Tracking T-cell immune reconstitution after TCRαβ/CD19-depleted hematopoietic cells transplantation in children. Leukemia 2017;31:1145–53. DOI: 10.1038/LEU.2016.321Благов С.Л., Шелихова Л.Н., Осипова Е.Ю., Киселева В.В., Казаченок А.С., Шеховцова Ж.Б. и др. Применение инфузий T-клеток памяти с целью профилактики вирусных инфекций у пациентов с гемобластозами, перенесших аллогенную трансплантацию гемопоэтических стволовых клеток с деплецией альфа/бета-Т-лимфоцитов. Вопросы гематологии/онкологии и иммунопатологии в педиатрии 2018;17(2):9–20. DOI: 10.24287/1726-1708-2018-17-2-9-20 [Blagov S.L., Shelikhova L.N., Osipova E.Yu., Kiseleva V.V., Kazachenok A.S., Shekhovtsova Zh.B. et al. Low dose donor memory T-cell infusion after TCR alpha/beta depleted stem cell transplantation for patients with malignant disorders. Pediatric Hematology/Oncology and Immunopathology 2018;17(2):9–20. (In Russ.)].Nesher L., Shah D.P., Ariza-Heredia E.J., Azzi J.M., Siddiqui H.K., Ghantoji S.S. et al. Utility of the enzyme-linked immunospot interferon-γ-release assay to predict the risk of cytomegalovirus infection in hematopoietic cell transplant recipients. J Infect Dis 2016;213:1701. DOI: 10.1093/INFDIS/JIW064Zamora D., Xie H., Wong E., Santiano C., Vivas-Jimenez A., Sadowska-Klasa A. et al. ELISPOT as a predictor of clinically significant cytomegalovirus infection after hematopoietic cell transplantation in letermovir recipients. Bone Marrow Transplantation 2025;60:1137–45. DOI: 10.1038/s41409-025-02611-4Wagner-Drouet E., Teschner D., Wolschke C., Janson D., Schäfer-Eckart K., Gärtner J. et al. Standardized monitoring of cytomegalovirus-specific immunity can improve risk stratification of recurrent cytomegalovirus reactivation after hematopoietic stem cell transplantation. Haematologica 2021;106:363–74. DOI: 10.3324/HAEMATOL.2019.229252Chemaly R.F., El Haddad L., Winston D.J., Rowley S.D., Mulane K.M., Chandrasekar P. et al. Cytomegalovirus (CMV) cell-mediated immunity and CMV infection after allogeneic hematopoietic cell transplantation: the REACT Study. Clin Infect Dis 2020;71:2365. DOI: 10.1093/CID/CIZ1210Merli P., Algeri M., Galaverna F., Bertaina V., Lucarelli B., Boccieri E. et al. TCRαβ/CD19 cell-depleted HLA-haploidentical transplantation to treat pediatric acute leukemia: updated final analysis. Blood 2024;143:279–89. DOI: 10.1182/BLOOD.2023021336Shelikhova L., Glushkova S., Nikolaev R., Dunaikina M., Zhekhovtsova Z., Blagov S. et al. Serotherapy-free regimen improves non-relapse mortality and immune recovery among the recipients of αβ T cell-depleted haploidentical grafts: retrospective study in childhood leukemia. Transplant Cell Ther 2021;27:330.e1–9. DOI: 10.1016/j.jtct.2021.01.010Dunaikina M., Zhekhovtsova Z., Shelikhova L., Glushkova S., Nikolaev R., Blagov S. et al. Safety and efficacy of the low-dose memory (CD45RA-depleted) donor lymphocyte infusion in recipients of aβ T cell-depleted haploidentical grafts: results of a prospective randomized trial in high-risk childhood leukemia. Bone Marrow Transplant 2021;56:1614–24. DOI: 10.1038/s41409-021-01232-xTeira P., Battiwalla M., Ramanathan M., Barrett A.J., Ahn K.W., Chen M. et al. Early cytomegalovirus reactivation remains associated with increased transplant-related mortality in the current era: a CIBMTR analysis. Blood 2016;127:2427–38. DOI: 10.1182/BLOOD-2015-11-679639Glushkova S., Shelikhova L., Voronin K., Dunaikina M., Blagov S., Pershin D. et al. Very early recovery of T cells after alpha/beta T cell-depleted haploidentical HSCT predicts the outcome in children with leukemia. Cytotherapy 2025;27(11):1344–50. DOI: 10.1016/J.JCYT.2025.07.005