pathologist, laboratory of clinical hemostasis,
1 Samory Mashela St., Moscow 117997
врач клинической лабораторной диагностики лаборатории клинического гемостаза,
17997, Москва, ул. Саморы Машела, 1
Moscow
Москва
Moscow
Москва
Moscow
Москва
Moscow
Москва
Moscow
Москва
Moscow
Москва
Moscow
Москва
Moscow
Москва
Moscow
Москва
Moscow;
Dolgoprudny
Москва;
Долгопрудный
Moscow
Москва
Despite modern possibilities of laboratory diagnosis of hemorrhagic syndrome, in some patients, the causes of bleeding remain unspecified. Among these reasons, mild defects in the platelet link of hemostasis can potentially be hidden. The aim of the work is to identify the features of the function of the platelet hemostasis in children with unspecified hemorrhagic syndrome. This study is supported by the Independent Ethics Committee and approved by the Academic Council of the Dmitry Rogachev National Medical Research Center of Pediatric Hematology, Oncology and Immunology. We examined 50 patients aged 2 to 17 years with various manifestations of bleeding and lack of laboratory data proving coagulopathy and/or thrombocytopenia; platelet cytofluorometry with activation was performed. The morphological characteristics of platelets in terms of size/granularity (FSC/SSC), the density of the CD62p receptor as a marker of a-granule secretion, and d-granules of platelets were assessed by the fluorescence of loaded mepacrine. Platelet activation was performed with a CRP + TRAP mixture. Comparison was carried out with the results of examination of 50 healthy children (control group - CG) aged 2 to 17 years. The severity of hemorrhagic syndrome was assessed using the standardized ISTH BAT score. The severity of hemorrhagic manifestations according to BAT ISTH score ranged from 2 to 6 points. As a result of the study, two groups of patients differing in the calculated parameter of the FSC/SSC ratio for non-activated platelets were identified. In the CG, the median FSC/SSC was 1.235 (from 1.1 to 1.4), in group 1 (n = 19), the median was 0.97 (from 0.9 to 1.05), and in group 2 (n = 31), the median was 1.24 (from 1.11 to 1.43). The number of platelets of the CG and the groups of patients did not differ significantly. A significant correlation between a decrease in the number of platelets and an increase in their size and granularity, while maintaining a high correlation between size and granularity was observed in groups of patients. In group 1, the overall granularity was increased regardless of the size and number of platelets, the volume of dense granules and membrane CD62p was increased, but the granular CD62p was decreased. The degranulation mechanism was not impaired in both groups of patients. Our results indicate convincingly the contribution of the storage pool and platelet morphology disorders to the development of hemorrhagic manifestations in children with unspecified hemorrhagic syndrome.
Несмотря на современные возможности лабораторной диагностики геморрагического синдрома, у некоторых пациентов причины кровоточивости остаются неуточненными. Среди данных причин потенциально могут скрываться легкие дефекты тромбоцитарного звена гемостаза. Цель работы: выявить особенности функции тромбоцитарного звена гемостаза у детей с неуточненным геморрагическим синдромом. Данное исследование одобрено независимым этическим комитетом и утверждено решением ученого совета ФГБУ «НМИЦ ДГОИ им. Дмитрия Рогачева» Минздрава России. Обследованы 50 пациентов в возрасте от 2 до 17 лет с различными проявлениями кровоточивости и отсутствием лабораторных данных за коагулопатию и/или тромбоцитопению, проведена цитофлуориметрия тромбоцитов с активацией. Оценены морфологические характеристики тромбоцитов по размеру/гранулярности (FSC/SSC), плотность рецептора CD62р как маркера секреции a-гранул, d-гранулы тромбоцитов по флуоресценции загруженного мепакрина. Активация тромбоцитов производилась смесью CRP + TRAP. Сравнение проводили с результатами обследования 50 условно здоровых детей (контрольная группа, КГ) в возрасте от 2 до 17 лет. Выраженность геморрагического синдрома оценивалась при помощи стандартизованной шкалы ISTH BAT. Тяжесть геморрагических проявлений по шкале ISTH BAT составила от 2 до 6 баллов. В результате проведенного исследования были выделены 2 группы пациентов, различающиеся по расчетному параметру отношения FSC/SSC, для неактивированных тромбоцитов. В КГ медиана FSC/SSC составила 1,235 (от 1,1 до 1,4), в группе 1 (n = 19) – 0,97 (от 0,9 до 1,05), и в группе 2 (n = 31) – 1,24 (от 1,11 до 1,43). Количество тромбоцитов достоверно не различалось между КГ и группами пациентов 1 и 2. В группах пациентов наблюдалась достоверная корреляционная связь между уменьшением количества тромбоцитов и увеличением их размера и гранулярности с сохранением высокой корреляционной связи между размером и гранулярностью. В группе 1 общая гранулярность была повышена независимо от размера и количества тромбоцитов, были увеличены объем плотных гранул и мембранный CD62p, но снижен гранулярный CD62p. Механизм дегрануляции не был нарушен в обеих группах пациентов. Полученные нами результаты убедительно указывают на вклад нарушений пула хранения и морфологии тромбоцитов в развитие геморрагических проявлений у детей с неуточненным геморрагическим синдромом.