Pediatric Hematology/Oncology and ImmunopathologyPediatric Hematology/Oncology and ImmunopathologyВопросы гематологии/онкологии и иммунопатологии в педиатрии1726-17082414-9314Fund Doctors, Innovations, Science for Children67110.24287/1726-1708-2023-22-1-12-20PROMISING STUDIESПЕРСПЕКТИВНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯThe use of droplet digital polymerase chain reaction for the molecular diagnosis and monitoring of treatment response in patients with Langerhans cell histiocytosis with the BRAF V600E mutationИспользование цифровой капельной полимеразной цепной реакции для молекулярной диагностики и мониторинга ответа на терапию при гистиоцитозе из клеток Лангерганса с мутацией BRAF V600Ehttps://orcid.org/0000-0002-9968-9332OsipovaD. S.ОсиповаД. С.
Russian Federation

 Daria S. Osipova, a research technician at the Laboratory of Molecular Biology

1 Samory Mashela St., Moscow 117997, Russia 

Осипова Дарья Сергеевна, лаборант-исследователь лаборатории молекулярной биологии

117997, Москва, ул. Саморы Машела, 1 

darya.osipova@fccho-moscow.ruhttps://orcid.org/0000-0002-7634-2053RaykinaE. V.РайкинаЕ. В.
Russian Federation

 Moscow 

Москва

e_raikina@inbox.ruhttps://orcid.org/0000-0003-0717-2019LyudovskikhE. I.ЛюдовскихЭ. И.
Russian Federation

 Moscow 

Москва

evcola@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0001-8610-0624EvseevD. A.ЕвсеевД. А.

 Moscow 

Москва

dmitryevseev1991@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0002-0813-5626KalininaI. I.КалининаИ. И.

 Moscow 

Москва

burbir@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0001-7130-8596BaydildinaD. D.БайдильдинаД. Д.

 Moscow 

Москва

Dina.Baydildina@fccho-moscow.ruhttps://orcid.org/0000-0002-0889-6986PopovA. M.ПоповА. М.

 Moscow 

Москва

uralcytometry@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0002-7082-1694SemchenkovaA. A.СемченковаА. А.

 Moscow 

Москва

sasha.semchenkova@fccho-moscow.ruhttps://orcid.org/0000-0002-3623-6547BurtsevE. A.БурцевЕ. А.

 Moscow 

Москва

burcev.evgeniy@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0002-0694-3996BroninG. O.БронинГ. О.

 Moscow 

 Москва 

gleb.bronin@ya.ruhttps://orcid.org/0000-0002-0016-6698MaschanA. A.МасчанА. А.

 Moscow 

 Москва 

Aleksey.Maschan@fccho-moscow.ruhttps://orcid.org/0000-0003-1735-0093MaschanM. A.МасчанМ. А.

 Moscow 

 Москва 

mmaschan@yandex.ruThe Dmitry Rogachev National Medical Research Center of Pediatric Hematology, Oncology and Immunology of Ministry of Healthcare of the Russian FederationФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр детской гематологии, онкологии и иммунологии им. Дмитрия Рогачева» Минздрава РоссииThe Morozov Children's City Clinical Hospital of the Department of Health of MoscowГосударственное бюджетное учреждение здравоохранения города Москвы «Морозовская детская городская клиническая больница Департамента здравоохранения города Москвы0103202322112202210202207022023Copyright ©; 2023, «D. Rogachev NMRCPHOI»Copyright ©; 2023, ФГБУ «НМИЦ ДГОИ им. Дмитрия Рогачева» Минздрава России2023«D. Rogachev NMRCPHOI»ФГБУ «НМИЦ ДГОИ им. Дмитрия Рогачева» Минздрава Россииhttps://creativecommons.org/licenses/by/4.0https://hemoncim.com/jour/article/view/671

This article discusses the potential of droplet digital polymerase chain reaction (PCR) for the diagnostic detection and monitoring of the allelic load of the BRAF V600E mutation in circulating cell-free DNA and myeloid progenitor cell population in the bone marrow of patients with Langerhans cell histiocytosis (LCH). Droplet digital PCR may serve as a useful tool for the monitoring of minimal residual disease and improve our understanding of the pathogenesis of Langerhans cells histiocytosis. The study was approved by the Independent Ethics Committee and the Scientific Council of the Dmitry Rogachev National Medical Research Center of Pediatric Hematology, Oncology and Immunology.

 В данной статье показаны возможности высокочувствительного метода цифровой капельной полимеразной цепной реакции в диагностике и мониторинге аллельной нагрузки мутации BRAF V600E в свободно циркулирующей ДНК, а также в популяции миелоидных предшественников костного мозга в группе пациентов с гистиоцитозом из клеток Лангерганса. Применение данной методики поможет определить подходы к оценке минимальной остаточной болезни, а также улучшить понимание распространенности процесса и патогенеза  гистиоцитоза из клеток Лангерганса. Исследование одобрено независимым этическим комитетом и утверждено решением ученого совета НМИЦ ДГОИ им. Дмитрия Рогачева. 

polymerase chain reactionLangerhans cell histiocytosismolecular diagnosisBRAF V600E mutationполимеразная цепная реакциягистиоцитоз из клеток Лангергансамолекулярная диагностикамутация BRAF V600EИсследование проведено при поддержке гранта Российского научного фонда, проект №22-15-00450.Haupt R., Minkov M., Astigarraga I., Schäfer E., Nanduri V., Jubran R., et al. Langerhans cell histiocytosis (LCH): guidelines for diagnosis, clinical work-up, and treatment for patients till the age of 18 years. Pediatr Blood Cancer 2013; 60 (2): 175–84.Harmon C.M., Brown N. Langerhans Cell Histiocytosis A Clinicopathologic Review and Molecular Pathogenetic Update. Arch Pathol Lab Med 2015; 139: 1211–4.Badalian-Very G., Vergilio J.-A., Degar B.A., MacConaill L.E., Brandner B., Calicchio M.L., et al. Recurrent BRAF mutations in Langerhans cell histiocytosis. Blood 2010; 116 (11): 1919–23.Wei R., Wang Z., Li X., Shu Y., Fu B. Frequent BRAFV600E mutation has no effect on tumor invasiveness in patients with Langerhans cell histiocytosis. Biomed Rep 2013; 1(3): 365–8.Bigenwald C., Le Berichel J., Matthias Wilk C., Chakraborty R, Chen S.T., Tabachnikova A., et al. BRAFV600E-induced senescence drives Langerhans cell histiocytosis pathophysiology. Nat Med 2021; 27 (5): 851.Berres M.-L., Phaik Har Lim K., Peters T., Price J., Takizawa H., Salmon H., et al. BRAF-V600E expression in precursor versus differentiated dendritic cells defines clinically distinct LCH risk groups. J Exp Med 2014; 211 (4) 669–83.Xiao Y., van Halteren A.G.S., Lei X., Borst J., Steenwijk E., de Wit T., et al. Bone marrow-derived myeloid progenitors as driver mutation carriers in high- And low-risk Langerhans cell histiocytosis. Blood 2020; 136 (19): 2188–99.LCH-IV, International Collaborative Treatment Protocol for Children and Adolescents With Langerhans Cell Histiocytosis – Full Text View – ClinicalTrials.gov [Electronic resource]. URL: https://clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT02205762 (accessed 26.10.2022).Проспективное нерандомизированное клиническое испытание фазы II вемурафениба в комбинации с цитарабином и 2-хлордезоксиаденозином у детей с гистоцитозом клеток Лангерганса с мутацией BRAF V600E [Электронный ресурс]. URL: https://ichgcp.net/ru/clinicaltrials-registry/NCT03585686 (дата обращения 26.10.2022).Evseev D., Kalinina I., Raykina E., Osipova D., Abashidze Z., Ignatova A., et al. Vemurafenib provides a rapid and robust clinical response in pediatric Langerhans cell histiocytosis with the BRAF V600E mutation but does not eliminate low-level minimal residual disease per ddPCR using cell-free circulating DNA. Int J Hematol 2021; 114 (6): 725–34.Bio-Rad. Rare Mutation Detection Best Practices Guidelines.Deprez L., Corbisier P., Kortekaas A.-M., Mazoua S., Beaz Hidalgo R., Trapmann S., et al. Validation of a digital PCR method for quantification of DNA copy number concentrations by using a certified reference material. Biomol Detect Quantif 2016; 9: 29–39.Héritier S., Hélias-Rodzewicz Z., Lapillonne H., Terrones N., Garrigou S., Normand C., et al. Circulating cell-free BRAFV600E as a biomarker in children with Langerhans cell histiocytosis. Br J Haematol 2017; 178 (3): 457–67.