Pediatric Hematology/Oncology and ImmunopathologyPediatric Hematology/Oncology and ImmunopathologyВопросы гематологии/онкологии и иммунопатологии в педиатрии1726-17082414-9314Fund Doctors, Innovations, Science for Children76510.24287/1726-1708-2023-22-3-43-47ORIGINAL ARTICLESОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИA single-center experience of using immunofluorescence staining of blood smears for the diagnosis of hereditary thrombocytopathiesОпыт использования иммунофлуоресцентного окрашивания мазков крови для диагностики наследственных тромбоцитопатийYushkovaE. V.ЮшковаЕ. В.
Russian Federation

Moscow

https://orcid.org/0000-0001-8013-1112PodoplelovaN. A.ПодоплеловаН. А.
Russian Federation

Nadezhda A. Podoplelova - PhD, a leading researcher at the Laboratory of Cell Hemostasis and Thrombosis.

1 Samory Mashela St., Moscow 117997

Подоплелова Надежда Александровна - ведущий научный сотрудник лаборатории клеточного гемостаза и тромбоза.

117997, Москва, ул. Саморы Машела, 1

https://orcid.org/0000-0003-4567-1871FedorovaD. V.ФедороваД. В.
Russian Federation

Moscow

Москва

https://orcid.org/0000-0002-8697-4206KhorevaA. L.ХореваА. Л.
Russian Federation

Moscow

Москва

https://orcid.org/0000-0002-3113-4939ShcherbinaA. Yu.ЩербинаА. Ю.
Russian Federation

Moscow

Москва

https://orcid.org/0000-0003-4384-6754ZharkovP. A.ЖарковП. А.
Russian Federation

Moscow

Москва

https://orcid.org/0000-0002-8128-7757PanteleevM. A.ПантелеевМ. А.
Russian Federation

Moscow

Москва

Dmitry Rogachev National Medical Research Center of Pediatric Hematology, Oncology and Immunology of Ministry of Healthcare of the Russian FederationФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр детской гематологии, онкологии и иммунологии им. Дмитрия Рогачева» Минздрава РоссииCenter for Theoretical Problems of Physicochemical PharmacologyФГБУН «Центр теоретических проблем физико-химической фармакологии» РАНФГБУН «Центр теоретических проблем физико-химической фармакологии» РАН0310202322343470110202301102023Copyright ©; 2023, «D. Rogachev NMRCPHOI»Copyright ©; 2023, ФГБУ «НМИЦ ДГОИ им. Дмитрия Рогачева» Минздрава России2023«D. Rogachev NMRCPHOI»ФГБУ «НМИЦ ДГОИ им. Дмитрия Рогачева» Минздрава Россииhttps://creativecommons.org/licenses/by/4.0https://hemoncim.com/jour/article/view/765

The method of immunofluorescence staining of blood smears is a recently developed approach to the remote diagnosis of various platelet pathologies including MYH9 disorders/MYH9-related disease, biallelic Bernard–Soulier syndrome, Glanzmann thrombasthenia, gray platelet syndrome, and others. We report here the experience of introducing this method at the Dmitry Rogachev National Medical Research Center of Pediatric Hematology, Oncology and Immunology (Moscow, Russia), which is the main national pediatric hematology hospital that provides diagnosis and therapy to children with blood disorders throughout the country. Our study aimed to transfer this relatively labor-intensive and skill-sensitive method and introduce it into routine laboratory practice, and to perform its validation. The study was approved by the Independent Ethics Committee and the Scientific Council of the Dmitry Rogachev National Medical Research Center of Pediatric Hematology, Oncology and Immunology.

Метод иммунофлуоресцентного окрашивания мазков крови является недавно разработанным подходом к дистанционной диагностике различных патологий тромбоцитов, включая MYH9-ассоциированную макротромбоцитопению, синдром Бернара–Сулье, тромбастению Гланцмана, синдром серых тромбоцитов, синдром Вискотта–Олдрича и т. д. В данной статье приведен опыт использования иммунофлуоресцентного окрашивания мазков крови для диагностики наследственных нарушений тромбоцитов в НМИЦ ДГОИ им. Дмитрия Рогачева. Целью исследования было перенести эту относительно трудоемкую методику и внедрить ее в рутинную лабораторную практику. Настоящее исследование одобрено независимым этическим комитетом и утверждено решением ученого совета НМИЦ ДГОИ им. Дмитрия Рогачева.

thrombocytopeniaplateletsplatelet disordersimmunofluorescenceтромбоцитопениятромбоцитынарушения тромбоцитовиммунофлуоресценцияИсследование выполнено при поддержке гранта Президента Российской Федерации МК-6271.2021.1.4 и гранта Российского научного фонда 23-45-100391. Gresele P.; Subcommittee on Platelet Physiology of the International Society on Thrombosis and Hemostasis. Diagnosis of Inherited Platelet Function Disorders: Guidance from the SSC of the ISTH. J Thromb Haemost 2015; 13 (2): 314–22. DOI: 10.1111/jth.12792Gresele P.; Subcommittee on Platelet Physiology of the International Society on Thrombosis and Hemostasis. Diagnosis of Inherited Platelet Function Disorders: Guidance from the SSC of the ISTH. J Thromb Haemost 2015; 13 (2): 314–22. DOI: 10.1111/jth.127922. Watson S.P., Lowe G.C., Lordkipanidzé M., Morgan N.V.; GAPP consortium. Genotyping and phenotyping of platelet function disorders. J Thromb Haemost 2013;11 Suppl 1: 351–63. DOI: 10.1111/jth.12199Watson S.P., Lowe G.C., Lordkipanidzé M., Morgan N.V.; GAPP consortium. Genotyping and phenotyping of platelet function disorders. J Thromb Haemost 2013;11 Suppl 1: 351–63. DOI: 10.1111/jth.121993. Фёдорова Д.В., Жарков П.А., Плясунова С.А., Серёгина Е.А., Игнатова А.А. Диагностика врожденных нарушений функций тромбоцитов: современное состояние вопроса. Вопросы гематологии/онкологии и иммунопатологии в педиатрии 2017; 16 (1): 83–95. DOI: 10.24287/1726-1708-2017-16-1-83-95Фёдорова Д.В., Жарков П.А., Плясунова С.А., Серёгина Е.А., Игнатова А.А. Диагностика врожденных нарушений функций тромбоцитов: современное состояние вопроса. Вопросы гематологии/онкологии и иммунопатологии в педиатрии 2017; 16 (1): 83–95. DOI: 10.24287/1726-1708-2017-16-1-83-954. Boender J., Kruip M.J.H.A., Leebeek F.W.G. A diagnostic approach to mild bleeding disorders. J Thromb Haemost 2016; 14 (8): 1507–16. DOI: 10.1111/jth.13368Boender J., Kruip M.J.H.A., Leebeek F.W.G. A diagnostic approach to mild bleeding disorders. J Thromb Haemost 2016; 14 (8): 1507–16. DOI: 10.1111/jth.133685. Bolton-Maggs P.H.B., Chalmers E.A., Collins P.W., Harrison P., Kitchen S., Liesner R.J., et al. A review of inherited platelet disorders with guidelines for their management on behalf of the UKHCDO. Br J Haematol 2006; 135 (5): 603–33. DOI: 10.1111/j.1365-2141.2006.06343.xBolton-Maggs P.H.B., Chalmers E.A., Collins P.W., Harrison P., Kitchen S., Liesner R.J., et al. A review of inherited platelet disorders with guidelines for their management on behalf of the UKHCDO. Br J Haematol 2006; 135 (5): 603–33. DOI: 10.1111/j.1365-2141.2006.06343.x6. Пономаренко Е.А., Игнатова А.А., Федорова Д.В., Жарков П.А., Пантелеев М.А. Функциональная активность тромбоцитов: физиология и методы лабораторной диагностики. Вопросы гематологии/онкологии и иммунопатологии в педиатрии 2019; 18 (3): 112–9. DOI: 10.24287/1726-1708-2019-18-3-112-119Пономаренко Е.А., Игнатова А.А., Федорова Д.В., Жарков П.А., Пантелеев М.А. Функциональная активность тромбоцитов: физиология и методы лабораторной диагностики. Вопросы гематологии/онкологии и иммунопатологии в педиатрии 2019; 18 (3): 112–9. DOI: 10.24287/1726-1708-2019-18-3-112-1197. Greinacher A., Pecci A., Kunishima S., Althaus K., Nurden P., Balduini C.L., et al. Diagnosis of inherited platelet disorders on a blood smear: a tool to facilitate worldwide diagnosis of platelet disorders. J Thromb Haemost 2017; 15 (7): 1511–21. DOI: 10.1111/jth.13729Greinacher A., Pecci A., Kunishima S., Althaus K., Nurden P., Balduini C.L., et al. Diagnosis of inherited platelet disorders on a blood smear: a tool to facilitate worldwide diagnosis of platelet disorders. J Thromb Haemost 2017; 15 (7): 1511–21. DOI: 10.1111/jth.137298. Bender M., Stritt S., Nurden P., Van Eeuwijk J.M.M., Zieger B., Kentouche K., et al. Megakaryocyte-specific Profilin1-deficiency alters microtubule stability and causes a Wiskott–Aldrich syndrome-like platelet defect. Nat Commun 2014; 5: 4746. DOI: 10.1038/ncomms5746Bender M., Stritt S., Nurden P., Van Eeuwijk J.M.M., Zieger B., Kentouche K., et al. Megakaryocyte-specific Profilin1-deficiency alters microtubule stability and causes a Wiskott–Aldrich syndrome-like platelet defect. Nat Commun 2014; 5: 4746. DOI: 10.1038/ncomms57469. López J.A., Andrews R.K., AfsharKharghan V., Berndt M.C. Bernard-Soulier Syndrome. Blood 1998; 91: 4397–418.López J.A., Andrews R.K., AfsharKharghan V., Berndt M.C. Bernard-Soulier Syndrome. Blood 1998; 91: 4397–418.10. Кумскова М.А., Дёмина И.А., Подоплелова Н.А., Баландина А.Н., Серёгина Е.А., Бондар Е.В. и др. Диагностика тромбастении Гланцмана с помощью исследования показателей плазменного и тромбоцитарного звеньев гемостаза. Вопросы гематологии/онкологии и иммунопатологии в педиатрии 2015; 14: 17–24.Кумскова М.А., Дёмина И.А., Подоплелова Н.А., Баландина А.Н., Серёгина Е.А., Бондар Е.В. и др. Диагностика тромбастении Гланцмана с помощью исследования показателей плазменного и тромбоцитарного звеньев гемостаза. Вопросы гематологии/онкологии и иммунопатологии в педиатрии 2015; 14: 17–24.11. George J., Caen J., Nurden A. Glanzmann’s Thrombasthenia: The Spectrum of Clinical Disease. Blood 1990; 75: 1383–95.George J., Caen J., Nurden A. Glanzmann’s Thrombasthenia: The Spectrum of Clinical Disease. Blood 1990; 75: 1383–95.12. Savoia A., De Rocco D., Panza E., Bozzi V., Scandellari R., Loffredo G., et al. Heavy chain myosin 9-related disease (MYH9-RD): Neutrophil inclusions of myosin-9 as a pathognomonic sign of the disorder. Thromb Haemost 2010; 103 (4): 826–32. DOI: 10.1160/TH09-08-0593Savoia A., De Rocco D., Panza E., Bozzi V., Scandellari R., Loffredo G., et al. Heavy chain myosin 9-related disease (MYH9-RD): Neutrophil inclusions of myosin-9 as a pathognomonic sign of the disorder. Thromb Haemost 2010; 103 (4): 826–32. DOI: 10.1160/TH09-08-059313. Kunishima S., Matsushita T., Kojima T., Sako M., Kimura F., Jo E.K., et al. Immunofluorescence Analysis of Neutrophil Nonmuscle Myosin Heavy Chain-A in MYH9 Disorders: Association of Subcellular Localization with MYH9 Mutations. Lab Invest 2003; 83 (1): 115–22. DOI: 10.1097/01.lab.0000050960.48774.17Kunishima S., Matsushita T., Kojima T., Sako M., Kimura F., Jo E.K., et al. Immunofluorescence Analysis of Neutrophil Nonmuscle Myosin Heavy Chain-A in MYH9 Disorders: Association of Subcellular Localization with MYH9 Mutations. Lab Invest 2003; 83 (1): 115–22. DOI: 10.1097/01.lab.0000050960.48774.1714. Мартьянов А.А., Морозова Д.С., Хорева А.Л., Пантелеев М.А., Щербина А.Ю., Свешникова А.Н. Особенности внутриклеточной кальциевой сигнализации тромбоцитов при синдроме Вискотта–Олдрича. Вопросы гематологии/онкологии и иммунопатологии в педиатрии 2020; 19 (1): 100–7. DOI: 10.24287/1726-1708-2020-19-1-100-107Мартьянов А.А., Морозова Д.С., Хорева А.Л., Пантелеев М.А., Щербина А.Ю., Свешникова А.Н. Особенности внутриклеточной кальциевой сигнализации тромбоцитов при синдроме Вискотта–Олдрича. Вопросы гематологии/онкологии и иммунопатологии в педиатрии 2020; 19 (1): 100–7. DOI: 10.24287/1726-1708-2020-19-1-100-10715. Antony-Debré I., Bluteau D., Itzykson R., Baccini V., Renneville A., Boehlen F., et al. MYH10 protein expression in platelets as a biomarker of RUNX1 and FLI1 alterations. Blood 2012; 120: 2719–22.Antony-Debré I., Bluteau D., Itzykson R., Baccini V., Renneville A., Boehlen F., et al. MYH10 protein expression in platelets as a biomarker of RUNX1 and FLI1 alterations. Blood 2012; 120: 2719–22.