Pediatric Hematology/Oncology and ImmunopathologyPediatric Hematology/Oncology and ImmunopathologyВопросы гематологии/онкологии и иммунопатологии в педиатрии1726-17082414-9314Fund Doctors, Innovations, Science for Children90210.24287/1726-1708-2024-23-3-102-115ORIGINAL ARTICLESОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИAdditional genetic aberrations detected by fluorescence in situ hybridization in children with acute lymphoblastic leukemia and the t(12;21)(p13;q22)/ETV6::RUNX1 translocation: an association with initial clinical and laboratory findings and response to therapyДополнительные генетические аберрации, выявляемые методом флуоресцентной гибридизации in situ, у детей с острым лимфобластным лейкозом и транслокацией t(12;21)(p13;q22)/ETV6::RUNX1: связь с инициальными клинико-лабораторными показателями и ответом на терапиюhttps://orcid.org/0009-0006-1533-7038KotovI. S.КотовИ. С.
Russian Federation

Ekaterinburg

Екатеринбург

https://orcid.org/0000-0002-9881-6221TsaurG. A.ЦаурГ. А.
Russian Federation

Grigory A. Tsaur - Dr. Med. Sci., Head of the Laboratory of Molecular Biology, Immunophenotyping and Pathomorphology at Sverdlovsk Regional Children’s CH, Head of the Laboratory of Cellular Therapy for Oncohematological Diseases at the Research Institute of Medical Cell Technologies, Associate Professor at the Chair of Medical Microbiology and Laboratory Medicine at USMU

32 S. Deryabinoy St., Ekaterinburg 620149

Цаур Григорий Анатольевич - д-р мед. наук, заведующий лабораторией молекулярной биологии, иммунофенотипирования и патоморфологии ГАУЗ СО «Областная детская клиническая больница», заведующий лабораторией клеточной терапии онкогематологических заболеваний ГАУЗ СО «Институт медицинских клеточных технологий», доцент кафедры медицинской микробиологии и клинической лабораторной диагностики ФГБОУ ВО «Уральский ГМУ».

620149, Екатеринбург, ул. С. Дерябиной, 32

tsaurga@mis66.ruhttps://orcid.org/0000-0003-0174-0345NokhrinaE. S.НохринаЕ. С.
Russian Federation

Ekaterinburg

Екатеринбург

RyakshinaA. V.РякшинаА. В.
Russian Federation

Ekaterinburg

Екатеринбург

https://orcid.org/0000-0002-2352-7716OlshanskayaYu. V.ОльшанскаяЮ. В.
Russian Federation

Moscow

Москва

https://orcid.org/0000-0003-1904-4989PermikinZh. V.ПермикинЖ. В.
Russian Federation

Ekaterinburg

Москва

https://orcid.org/0000-0001-9329-1828VerzhbitskayaT. Yu.ВержбицкаяТ. Ю.
Russian Federation

Ekaterinburg

Екатеринбург

https://orcid.org/0000-0002-1324-3568RigerT. O.РигерТ. О.
Russian Federation

Ekaterinburg

Екатеринбург

https://orcid.org/0000-0002-0150-6471PonomarevA. I.ПономаревА. И.
Russian Federation

Ekaterinburg

Екатеринбург

StrenevaO. V.СтреневаО. В.
Russian Federation

Ekaterinburg

Екатеринбург

ArakaevO. R.АракаевО. Р.
Russian Federation

Ekaterinburg

Екатеринбург

https://orcid.org/0000-0003-0185-0050TsvirenkoS. V.ЦвиренкоС. В.
Russian Federation

Екатеринбург

https://orcid.org/0000-0002-5250-7351KovtunO. P.КовтунО. П.
Russian Federation

Ekaterinburg

Екатеринбург

https://orcid.org/0000-0002-1885-3912FechinaL. G.ФечинаЛ. Г.
Russian Federation

Ekaterinburg

Ural State Medical University of Ministry of Healthcare of the Russian FederationФГБОУ ВО «Уральский государственный медицинский университет» Минздрава РоссииRegional Children’s Clinical HospitalГАУЗ СО «Областная детская клиническая больница»Research Institute of Medical Cell TechnologiesГАУЗ СО «Институт медицинских клеточных технологий»Dmitry Rogachev National Medical Research Center of Pediatric Hematology, Oncology and Immunology of Ministry of Healthcare of the Russian FederationФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр детской гематологии, онкологии и иммунологии им. Дмитрия Рогачева» Минздрава России080920242331021151510202415102024Copyright ©; 2025, «D. Rogachev NMRCPHOI»Copyright ©; 2025, ФГБУ «НМИЦ ДГОИ им. Дмитрия Рогачева» Минздрава России2025«D. Rogachev NMRCPHOI»ФГБУ «НМИЦ ДГОИ им. Дмитрия Рогачева» Минздрава Россииhttps://creativecommons.org/licenses/by/4.0https://hemoncim.com/jour/article/view/902

Translocation t(12;21)(p13;q22)/ETV6::RUNX1 is among the most common genetic aberrations in pediatric B-cell precursor acute lymphoblastic leukekian (BCP-ALL). This translocation is often combined with ETV6 and/or RUNX1 copy number variations. Fluorescence in situ hybridization (FISH) technique, which is widely used to reveal the presence of t(12;21)(p13;q22), also allows the detection of these additional genetic aberrations (FISH patterns). The aim of this study was to provide detailed characteristics of FISH patterns in patients with BCP-ALL and the t(12;21)(p13;q22)/ETV6::RUNX1 translocation. In our study we enrolled 241 patients with t(12;21)-positive ALL who had undergone testing with a dual-color double-fusion FISH assay between 2008 and 2023. This study was approved by the Independent Ethics Committee and the Academic Council of the Research Institute of Medical Cell Technologies (Ekaterinburg). A single FISH pattern (monoclonal cases) was identified in 200 patients (83.0%), 2 or more patterns (polyclonal cases) were detected in 41 (17.0%) patients. The majority of polyclonal cases (n = 39; 95.1%) exhibited 2 patterns. The most common secondary genetic alteration was ETV6 deletion (n = 105; 43.5%). Less common aberrations included an additional copy of RUNX1 (n = 97; 40.2%), a combination of ETV6 deletion and an additional copy of RUNX1 (n = 27; 11.2%), and an additional copy of ETV6 (n = 5; 2.0%). The number of the patients with one FISH pattern that did not contain any additional genetic aberrations as a result of a reciprocal translocation (2F1G1R) was relatively small (n = 35; 17.5%). We identified 5 prognostically unfavorable FISH patterns associated with a high risk of relapse. These included cases with simultaneous presence of ETV6 and RUNX1 additional copies (pattern 2F2G2R), isolated additional copies of RUNX1 (pattern 2F2R-3F2R) or ETV6 (pattern 1F1G2R-2F2G4R), a partial deletion of ETV6 (pattern 2F1Gdim1R) and a non-reciprocal translocation of t(12;21) (pattern 1F1R-1F1G1R). Grouping these unfavorable prognostic FISH patterns together made it possible to predict 6 (46%) out of 13 relapses that occurred in the patients during the study period. It is important to highlight that the number of the patients with unfavorable FISH patterns and initial leukocytosis of > 30 × 109 leukocytes/L did not differ significantly from the rest of the group. Another important observation was that the patients with prognostically unfavorable FISH patterns responded well to induction therapy, as assessed both by cytological examination of blood and bone marrow smears on days 8, 15, and 36 of therapy and by MRD response at the end of induction therapy according to the ALL-MB 2015 protocol. A comparison of FISH patterns detected at initial diagnosis and at relapse showed that only 6 (50%) out of 12 cases who had undergone FISH testing at both time points remained stable. In conclusion, BCP-ALL with the translocation t(12;21)(p13;q22)/ETV6::RUNX1 was characterized by a vast variety of secondary genetic aberrations detected by FISH, the most prevalent of which was ETV6 deletion. A group of unfavorable FISH patterns identified in our study warrants further investigation in a larger cohort of ALL patients for their possible re-stratification so that they could receive more intensive treatment.

Транслокация t(12;21)(p13;q22)/ETV6::RUNX1 является одной из наиболее частых генетических аберраций при остром лимфобластном лейкозе из В-линейных предшественников (BПОЛЛ) у детей. Данная транслокация часто сочетается с изменением числа копий аллей генов ETV6 и RUNX1. Технология флуоресцентной гибридизации in situ (FISH), которая широко применяется для выявления t(12;21)(p13;q22), также позволяет детектировать и эти дополнительные генетические аберрации (FISH-паттерны). Целью данной работы являлась детальная характеристика FISH-паттернов у пациентов с ВП-ОЛЛ и наличием транслокации t(12;21)(p13;q22)/ETV6::RUNX1. В работу включен 241 пациент с t(12;21)позитивным ОЛЛ, которым было проведено исследование методом FISH с использованием двухцветного флуоресцентного зонда с двойным слиянием в период с 2008 по 2023 г. Данное исследование одобрено независимым этическим комитетом и утверждено решением ученого совета ГАУЗ СO «Институт медицинских клеточных технологий» (Екатеринбург). Единственный FISH-паттерн (моноклональные случаи) был выявлен в 200 (83,0%) случаях, 2 паттерна и более (поликлональные случаи) – в 41 (17,0%). Среди последних подавляющее большинство (n = 39; 95,1%) имели по 2 паттерна. Наиболее распространенным вторичным генетическим изменением оказалась делеция ETV6 (n = 105; 43,5%). Несколько реже выявляли дополнительную копию RUNX1 (n = 97; 40,2%), сочетание делеции ETV6 и дополнительной копии RUNX1 (n = 27; 11,2%), а также дополнительную копию ETV6 (n = 5; 2,0%). Доля пациентов с одним FISHпаттерном, который не содержал дополнительных генетических изменений и был следствием стандартной реципрокной транслокации (2F1G1R), оказалась относительно небольшой (n = 35; 17,5%). Были выявлены 5 прогностически неблагоприятных FISH-паттернов, ассоциированных с высоким риском рецидива. В их число входили случаи с одновременным наличием дополнительных копий ETV6 и RUNX1 (паттерн 2F2G2R), а также с изолированными дополнительными копиями RUNX1 (паттерн 2F2R-3F2R) или ETV6 (паттерн 1F1G2R-2F2G4R), частичной делецией ETV6 (паттерн 2F1Gdim1R) и нереципрокной транслокацией t(12;21) (паттерн 1F1R-1F1G1R). Объединение этих прогностически неблагоприятных FISH-паттернов в 1 группу позволило спрогнозировать 6 (46%) из 13 рецидивов, развившихся у пациентов, включенных в анализ, за исследуемый период. Важно подчеркнуть, что доля пациентов с неблагоприятными FISH-паттернами и инициальным лейкоцитозом выше 30 × 109/л достоверно не отличалась от остальной группы пациентов. Еще одним важным наблюдением являлось то, что пациенты с прогностически неблагоприятными FISH-паттернами хорошо отвечали на индукционную терапию как по данным цитологического исследования крови и костного мозга на 8, 15 и 36-й дни терапии, так и по результатам определения минимальной остаточной болезни на момент окончания индукционной терапии по протоколу ALL-MB 2015. Сравнение паттернов на этапах первичной диагностики и диагностики рецидива показало, что только 6 (50%) из 12 оцениваемых случаев, которым было проведено FISH-исследование в обеих точках наблюдения, сохранили стабильность. Таким образом, ВП-ОЛЛ с транслокацией t(12;21)(p13;q22)/ETV6::RUNX1 характеризуется большим разнообразием вторичных генетических вариантов, выявляемых с помощью метода FISH, наиболее частой из которых является делеция ETV6. Выявленная нами группа прогностически неблагоприятных FISН-паттернов требует дальнейшего изучения на большей когорте пациентов в целях возможной их рестратификации для более интенсивного лечения.

acute lymphoblastic leukemiachildrent(1221)(p13q22) translocationETV6::RUNX1fluorescence in situ hybridizationострый лимфобластный лейкоздетитранслокация t(1221)(p13q22)ETV6::RUNX1флуоресцентная гибридизация in situНе указанFord A.M., Bennett C.A., Price C.M., Bruin M.C., Van Wering E.R., Greaves M., et al. Fetal origins of the TEL-AML1 fusion gene in identical twins with leukemia. Proc Natl Acad Sci U S A 1998; 95: 4584–8.Wiemels J.L., Cazzaniga G., Daniotti M., Eden O.B., Addison G.M., Masera G., et al. Prenatal origin of acute lymphoblastic leukaemia in children. Lancet 1999; 354: 1499–503.Lausten-Thomsen U., Madsen H.O., Vestergaard T.R., Hjalgrim H., Nersting J., Schmiegelow K. Prevalence of t(12;21)[ETV6-RUNX1]-positive cells in healthy neonates. Blood 2011; 117: 186–9.Stams W.A., Beverloo H.B., den Boer M.L., de Menezes R.X., Stigter R.L., van Drunen E., et al. Incidence of additional genetic changes in the TEL and AML1 genes in DCOG and COALL-treated t(12;21)-positive pediatric ALL, and their relation with drug sensitivity and clinical outcome. Leukemia 2006; 20 (3): 410–6.De Braekeleer E., Douet-Guilbert N., Morel F., Le Bris M.-J., Basinko A., De Braekeleer M. ETV6 fusion genes in hematological malignancies: a review. Leuk Res 2012; 36 (8): 945–61.De Braekeleer E., Douet-Guilbert N., Morel F., Le Bris M.-J., Férec C., De Braekeleer M. RUNX1 translocations and fusion genes in malignant hemopathies. Future Oncol 2011; 7 (1): 77–91.Sood R., Kamikubo Y., Liu P. Role of RUNX1 in hematological malignancies. Blood 2017; 129 (15): 2070–82.Fuka G., Kauer M., Kofler R., Haas O.A., Panzer-Grümayer R. The leukemia-specific fusion gene ETV6/RUNX1 perturbs distinct key biological functions primarily by gene repression. PLoS One 2011; 6: 26348.Sun C., Chang L., Zhu X. Pathogenesis of ETV6/RUNX1-positive childhood acute lymphoblastic leukemia and mechanisms underlying its relapse. Oncotarget 2017; 8: 35445–59.Sundaresh A., Gasparoli L., Mangolini M., Edwards D., Hubank M., Brooks T., et al. Aberrant transcriptional pathways in t (12; 21) Acute Lymphoblastic Leukemia. Klinische Pädiatrie 2016; 228: A12.Fuka G., Kantner H.P., Grausenburger R., Inthal A., Bauer E., Krapf G., et al. Silencing of ETV6/ RUNX1 abrogates PI3K/AKT/mTOR signaling and impairs reconstitution of leukemia in xenografts. Leukemia 2012; 26: 927–33.Raynaud S.D., Dastugue N., Zoccola D., Shurtleff S.A., Mathew S., Raimondi S.C. Cytogenetic abnormalities associated with the t(12;21): a collaborative study of 169 children with t(12;21)-positive acute lymphoblastic leukemia. Leukemia 1999; 13 (9): 1325–30.Raynaud S., Cave H., Baens M., Bastard C., Cacheux V., Grosgeorge J., et al. The 12;21 translocation involving TEL and deletion of the other TEL allele: two frequently associated alterations found in childhood acute lymphoblastic leukemia. Blood 1996; 87: 2891–9.Cave H., Cacheux V., Raynaud S., Brunie G., Bakkus M., Cochaux P., et al. ETV6 is the target of chromosome 12p deletions in t(12;21) childhood acute lymphocytic leukemia. Leukemia 1997; 11: 1459–64.Peter A., Heiden T., Taube T., Körner G., Seeger K. Interphase FISH on TEL/AML1 positive acute lymphoblastic leukemia relapses--analysis of clinical relevance of additional TEL and AML1 copy number changes. Eur J Haematol 2009; 83: 420–32.Fears S., Vignon C., Bohlander S.K., Smith S., Rowley J.D., Nucifora G. Correlation between the ETV6/ CBFA2 (TEL/AML1) fusion gene and karyotypic abnormalities in children with B-cell precursor acute lymphoblastic leukemia. Genes Chromosomes Cancer 1996; 17: 127–35.Sawinska M., Ladon D. Mechanism, detection and clinical significance of the reciprocal translocation t(12;21) (p12;q22) in the children suffering from acute lymphoblastic leukaemia. Leuk Res 2004; 28: 35–42.Harada H., Harada Y. Point mutations in the AML1/RUNX1 gene associated with myelodysplastic syndrome. Crit Rev Eukaryot Gene Expr 2005; 15 (3): 183–96.Bhojwani D., Pei D., Sandlund J.T., Jeha S., Ribeiro R.C., Rubnitz J.E., et al. ETV6-RUNX1-positive childhood acute lymphoblastic leukemia: improved outcome with contemporary therapy. Leukemia 2012; 2 (26): 265–70.Moorman A.V., Ensor H.M., Richards S.M., Chilton L., Schwab C., Kinsey S.E., et al. Prognostic effect of chromosomal abnormalities in childhood B-cell precursor acute lymphoblastic leukaemia: results from the UK Medical Research Council ALL97/99 randomised trial. Lancet Oncol 2010; 11 (5): 429–38.Borst L., Wesolowska A., Joshi T., Borup R., Nielsen F.C., Andersen M.K., et al. Genome-wide analysis of cytogenetic aberrations in ETV6/RUNX1-positive childhood acute lymphoblastic leukaemia. Br J Haematol 2012; 157: 476–82.Bokemeyer A., Eckert C., Meyr F., Koerner G., von Stackelberg A., Ullmann R., et al. Copy number genome alterations are associated with treatment response and outcome in relapsed childhood ETV6/ RUNX1-positive acute lymphoblastic leukemia. Haematologica 2014; 99: 706–14.Hunger S.P., Mullighan C.G. Acute Lymphoblastic Leukemia in Children. New Engl J Med 2015; 373 (16): 1541–52.Roberts K.G., Mullighan C.G. Genomics in acute lymphoblastic leukaemia: insights and treatment implications. Nat Rev Clin Oncol 2015; 12: 344–57.Greaves M.F., Maia A.T., Wiemels J.L., Ford A.M. Leukemia in twins: lessons in natural history. Blood 2003; 102: 2321.Mullighan C.G., Phillips L.A., Su X., Ma J., Miller C.B., Shurtleff S.A., Downing J.R. Genomic analysis of the clonal origins of relapsed acute lymphoblastic leukemia. Science 2008; 322: 1377–80.Szczepanski T., Willemse M.J., Brinkhof B., van Wering E.R., van der Burg M., van Dongen J.J.M. Comparative analysis of Ig and TCR gene rearrangements at diagnosis and at relapse of childhood precursor-B-ALL provides improved strategies for selection of stable PCR targets for monitoring of minimal residual disease. Blood 2002; 99: 2315–23.Kuster L., Grausenburger R., Fuka G., Kaindl U., Krapf G., Inthal A., et al. ETV6/RUNX1-positive relapses evolve from an ancestral clone and frequently acquire deletions of genes implicated in glucocorticoid signaling. Blood Cancer J 2011; 117: 2658–67.van Delft F.W., Horsley S., Colman S., Anderson K., Bateman C., Kempski H., et al. Clonal origins of relapse in ETV6RUNX1 acute lymphoblastic leukemia. Blood 2011; 117: 6247–54.Yang J.J., Bhojwani D., Yang W., Cai X., Stocco G., Crews K., et al. Genome-wide copy number profiling reveals molecular evolution from diagnosis to relapse in childhood acute lymphoblastic leukemia. Blood 2008; 112: 4178–83.Jin Y., Wang X., Hu S., Tang J., Li B., Chai Y. Determination of ETV6RUNX1 genomic breakpoint by next-generation sequencing. Cancer Med 2016; 5: 337–51.Barbany G., Andersen M.K., Autio K., Borgström G., Cavalier Franco L., Golovleva I., et al. Additional aberrations of the ETV6 and RUNX1 genes have no prognostic impact in 229 t(12;21) (p13;q22)-positive B-cell precursor acute lymphoblastic leukaemias treated according to the NOPHO-ALL-2000 protocol. Leuk Res 2012; 36 (7): 936–8.Kutlay N.Y., Pekpak E., Altıner S., Ileri T., Nedime Vicdan A., Dinçaslan H., et al. Prognostic impact of RUNX1 and ETV6 gene copy number on pediatric B-cell precursor acute lymphoblastic leukemia with or without hyperdiploidy. Int J Hematol 2016; 104 (3): 368–77.Tsaur G.А., Olshanskaya Yu.V., Obukhova T.N., Sudarikov A.B., Lazareva O.V., Gindina T.L. Cytogenetic and molecular genetic diagnostics in oncohematological disorders: a position paper of the Organization of Molecular Geneticists in Oncology and Oncohematology. Russian journal of hematology and transfusiology 2023; 68 (1): 129–43. (In Russ.). DOI: 10.35754/0234-5730-2023-68-1-129-143Цаур Г.А., Ольшанская Ю.В., Обухова Т.Н., Судариков А.Б., Лазарева О.В., Гиндина Т.Л. Цитогенетическая и молекулярно-генетическая диагностика онкогематологических заболеваний: позиция Организации молекулярных генетиков в онкологии и онкогематологии. Гематология и трансфузиология 2023; 68 (1): 129–43. DOI: 10.35754/0234-5730-2023-68-1-129-143Borkhardt A., Cazzaniga G., Viehmann S., Valsecchi M.G., Ludwig W.D., Burci L., et al. Incidence and clinical relevance of TEL/AML1 fusion genes in children with acute lymphoblastic leukemia enrolled in the German and Italian multicenter therapy trials. Blood 1997; 90 (2): 571–7.Tsaur G.A., Riger Т.О., Popov A.M., Verzhbitskaya T.Yu., Vakhonina L.V., Vlasova A.A., et al. Significance of ETV6-RUNX1 fusion gene transcript detection in pediatric B-cell precursor acute lymphoblastic leukemia with translocation t(12;21)(p13;q22). Oncohematology 2017; 12 (4): 57–70. (In Russ.). DOI: 10.17650/1818-8346-2017-12-4-57-70Цаур Г.А., Ригер Т.О., Попов А.М., Вержбицкая Т.Ю., Вахонина Л.В., Власова А.А. и др. Значение опре де ления химерног о транскрипта ETV6-R UNX1 методом полимеразной цепной реакции у детей с острым лимфобластным лейкозом из B-линейных предшественников с наличием транслокации t(12;21) (p13;q22). Онког ематология 2017; 12 (4): 57–70. DOI: 10.17650/1818-8346-2017-12-4-57-70Romana S.P., Mauchauffe M., Le Coniat M., Chumakov I., Le Paslier D., Berger R., et al. The t(12;21) of acute lymphoblastic leukemia results in a tel-AML1 gene fusion. Blood 1995; 85 (12): 3662–70.Popov A.M., Mikhailova E.V., Verzhbitskaya T.Yu., Movchan L.V., Permikin Zh.V., Shman T.V., et al. Minimal residual disease monitoring in B-lineage acute lymphoblastic leukemia using flow cytometry. Guidelines of the Russian-Belarusian multicenter group for pediatric acute leukemia studies. Pediatric Hematology/Oncology and Immunopathology 2023; 22 (3): 199–209. (In Russ.). DOI: 10.24287/1726-1708-2023-22-3-199-209Попов А.М., Михайлова Е.В., Вержбицкая Т.Ю., Мовчан Л.В., Пермикин Ж.В., Шман Т.В. и др. Определение минимальной остаточной болезни при В-линейном остром лимфобластном лейкозе методом проточной цитометрии. Р ек омендации рос сийск обелорусской кооперативной группы по диагностике острых лейкозов у детей. Вопросы гематологии/ онкологии и иммунопатологии в педиатрии 2023; 22 (3): 199–209. DOI: 10.24287/1726-1708-2023-22-3-199-209Chae H., Kim M., Lim J., Kim Y., Han K., Lee S. B lymphoblastic leukemia with ETV6 amplification. Cancer Genet Cytogenet 2010; 203 (2): 284–7.Alvarez Y., Coll M.D., Ortega J.J., Bastida P., Dastugue N., Robert A., et al. Genetic abnormalities associated with the t(12;21) and their impact in the outcome of 56 patients with B-precursor acute lymphoblastic leukemia. Cancer Genet Cytogenet 2005; 162 (1): 21–9.Krstic A.D., Impera L., GucScekic M., Lakic N., Djokic D., Slavkovic B., Tiziana Storlazzi C. A complex rearrangement involving cryptic deletion of ETV6 and CDKN1B genes in a case of childhood acute lymphoblastic leukemia. Cancer Genet Cytogenet 2009; 195 (2): 125–31.Ko D.H., Jeon Y., Kang H.J., Duk Park K., Young Shin H., Kyung Kim H., et al. Native ETV6 deletions accompanied by ETV6-RUNX1 rearrangements are associated with a favourable prognosis in childhood acute lymphoblastic leukaemia: a candidate for prognostic marker. Br J Haematol 2011; 155 (4): 530–3.