Анализ функции ингибирования тромбоцитов по фосфорилированию внутриклеточного цитоскелетного белка VASP в цельной крови во времени

Обложка
  • Авторы: Артеменко Е.О.1,2, Чабин И.А.2, Пантелеев М.А.1,2,3
  • Учреждения:
    1. ФГБУН «Центр теоретических проблем физико-химической фармакологии» РАН
    2. ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр детской гематологии, онкологии и иммунологии им. Дмитрия Рогачева» Минздрава России
    3. ФГБОУ ВО «Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова»
  • Выпуск: Том 23, № 4 (2024)
  • Страницы: 54-57
  • Раздел: ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ
  • Статья получена: 13.09.2024
  • Статья одобрена: 07.11.2024
  • Статья опубликована: 13.12.2024
  • URL: https://hemoncim.com/jour/article/view/890
  • DOI: https://doi.org/10.24287/1726-1708-2024-23-4-54-57
  • ID: 890

Цитировать

Полный текст

Аннотация

Состояние тромбоцитов может зависеть от времени, прошедшего с момента забора крови, в первую очередь из-за наличия в циркуляции короткоживущих ингибиторов их активации. В данной работе проанализировано фосфорилирование белка VASP (vasodilator-stimulated phosphoprotein), которое коррелирует с функцией ингибирования тромбоцитов в зависимости от времени с помощью проточной цитометрии. Данное исследование одобрено независимым этическим комитетом и утверждено решением ученого совета ФГБУ «НМИЦ ДГОИ им. Дмитрия Рогачева» Минздрава России. Мы исследовали фосфорилирование VASP тромбоцитов в цельной крови сразу после ее взятия из вены и через 60 мин. В качестве положительного контроля нами использовано ингибирование функции тромбоцитов с помощью простагландина Е1. В результате мы выяснили, что фосфорилирование VASP в тромбоцитах не отличалось достоверно в цельной крови сразу после ее взятия и через 60 мин, в то время как наблюдалось заметное его увеличение при ингибировании тромбоцитов с помощью простагландина Е1. Полученные данные предполагают, что состояние тромбоцитов не изменяется заметным образом в течение 60 мин после взятия крови из вены.

Об авторах

Е. О. Артеменко

ФГБУН «Центр теоретических проблем физико-химической фармакологии» РАН;
ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр детской гематологии, онкологии и иммунологии им. Дмитрия Рогачева» Минздрава России

Автор, ответственный за переписку.
Email: lartemenko@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0002-0193-0723

Артеменко Елена Олеговна, научный сотрудник лаборатории клеточного гемостаза и тромбоза  ФГБУ «НМИЦ ДГОИ им. Дмитрия Рогачева» Минздрава России

117997, Москва, ул. Саморы Машела, 1

Россия

И. А. Чабин

ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр детской гематологии, онкологии и иммунологии им. Дмитрия Рогачева» Минздрава России

ORCID iD: 0000-0003-0625-1743

Москва

Россия

М. А. Пантелеев

ФГБУН «Центр теоретических проблем физико-химической фармакологии» РАН;
ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр детской гематологии, онкологии и иммунологии им. Дмитрия Рогачева» Минздрава России;
ФГБОУ ВО «Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова»

ORCID iD: 0000-0002-8128-7757

Москва

Россия

Список литературы

  1. Sveshnikova A.N., Stepanyan M.G., Panteleev M.A. Platelet functional responses and signalling: the molecular relationship. Part 1: responses. Part 1: answers. Systems Biology and Physiology Reports 2022; 1 (1): 14–23. (In Russ.)
  2. Kadyrov T.I., Sveshnikova A.N., Panteleev M.A. Plasma membrane repair, blebbing and microvesiculation: parallels and relationships. Systems Biology and Physiology Reports 2022; 1 (2): 13–20. (In Russ.)
  3. Kovalenko T.A. Annexin V: the membrane-binding protein with diverse functions. Systems Biology and Physiology Reports 2022; 1 (2): 21–33. (In Russ.)
  4. Obydennyi S.I. An advantage of lactadgerin in the assessment of phosphatidylserine exposure in platelets. Systems Biology and Physiology Reports 2023; 2 (1): 11–3. (In Russ.)
  5. Braune S., Küpper J.H., Jung F. Effect of Prostanoids on Human Platelet Function: An Overview. Int J Mol Sci 2020; 21 (23): 9020. doi: 10.3390/ijms21239020
  6. Broos K., Feys H.B., De Meyer S.F., Vanhoorelbeke K., Deckmyn H. Platelets at work in primary hemostasis. Blood Rev 2011; 25 (4): 155–67. doi: 10.1016/j.blre.2011.03.002
  7. Horstrup K., Jablonka B., Hönig-Liedl P., Just M., Kochsiek K., Walter U. Phosphorylation of focal adhesion vasodilator-stimulated phosphoprotein at Ser157 in intact human platelets correlates with fibrinogen receptor inhibition. Eur J Biochem 1994; 225: 21–7.
  8. Butt E., Abel K., Krieger M., Palm D., Hoppe V., Hoppe J., et al. cAMP- and cGMP-dependent protein kinase phosphorylation sites of the focal adhesion vasodilator-stimulated phosphoprotein (VASP) in vitro and in intact human platelets. J Biol Chem 1994; 269 (20): 14509–17.
  9. Chitaley K., Chen L., Galler A., Walter U., Daum G., Clowes A.W. Vasodilator-stimulated phosphoprotein is a substrate for protein kinase C. FEBS Lett 2004; 556: 211–5. doi: 10.1016/S0014-5793(03)01435-2
  10. Smolenski A., Bachmann C., Reinhard K., Hönig-Liedl P., Jarchau T., Hoschuetzky H., et al. Analysis and regulation of vasodilator-stimulated phosphoprotein serine 239 phosphorylation in vitro and in intact cells using a phosphospecific monoclonal antibody. J Biol Chem 1998; 273 (32): 20029–35. doi: 10.1074/jbc.273.32.20029
  11. Schwarz U.R., Geiger J., Walter U., Eigenthaler M. Flow cytometry analysis of intracellular VASP phosphorylation for the assessment of activating and inhibitory signal transduction pathways in human platelets – definition and detection of ticlopidine/clopidogrel effects. Thromb Haemost 1999; 82 (3): 1145–52.
  12. Algahtani M., Heptinstall S. Novel strategies for assessing platelet reactivity. Future Cardiol 2017; 13 (1): 33–47. doi: 10.2217/fca-2016-0054
  13. Mallouk N., Varvat J., Berger A., Epinat M., Accassat S., Garcin A., et al. Assessment of a flow cytometry technique for studying signaling pathways in platelets: Monitoring of VASP phosphorylation in clinical samples. Pract Lab Med 2018; 11: 10–8. doi: 10.1016/j.plabm.2018.02.002
  14. Jakubowski J.A., Payne C.D., Li Y.G., Farid N.A., Brandt J.T., Small D.S., et al. A comparison of the antiplatelet effects of prasugrel and high-dose clopidogrel as assessed by VASP-phosphorylation and light transmission aggregometry. Thromb Haemost 2008; 99 (1): 215–22. doi: 10.1160/TH07-09-0555
  15. Glenn J.R., Dovlatova N., White A.E., Dhillon K., Heptinstall S., Fox S.C. 'VASPFix' for measurement of VASP phosphorylation in platelets and for monitoring effects of P2Y12 antagonists. Thromb Haemost 2014; 111 (3): 539–48. doi: 10.1160/TH13-07-0581
  16. Sudo T., Ito H., Kimura Y. Phosphorylation of the vasodilator-stimulated phosphoprotein (VASP) by the anti-platelet drug, cilostazol, in platelets. Platelets 2003; 14 (6): 381–90. doi: 10.1080/09537100310001598819
  17. Srihirun S., Schechter A.N., Piknova B. Platelet-based Detection of Nitric Oxide in Blood by Measuring VASP Phosphorylation. J Vis Exp 2019; (143): 10.3791/58647. doi: 10.3791/58647

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© Артеменко Е.О., Чабин И.А., Пантелеев М.А., 2024

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.